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用移液管吸取0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL亚硝酸钠溶液(相当于1ug,2ug,3ug,4ug,5ug和7.5ug亚硝酸钠),分别置于50mL比色管中,再取1支比色管作为空白对照。 并分别加入2.0mL对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3~5分钟后; 再分别加入1.0mL N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液,加蒸馏水至50mL,混匀; 观察亚硝酸钠溶液颜色的梯度变化(玫瑰红色逐渐加深)。 (2) 配制标准显色液 样品处理液的制备 增加亚硝酸盐的溶解度 吸附杂质,脱色,净化作用 中和乳酸 (3).制备样品 样品即滤液加入比色管 显色反应:先加对氨基苯磺酸 ,后加 N-1-萘基乙二胺盐酸盐 比色:显色后与标准显色液对比,找出颜色最相近的记录对应亚硝酸盐含量 (4).比色 酸化:对氨基苯磺酸溶于盐酸中 重氮化:亚硝酸盐+对氨基苯磺酸 重氮盐 酸 显色:重氮盐+ N-1-萘基乙二胺盐酸盐 比色:样品和标准比色液对比,估算亚硝酸盐含量 ① ② ③ 玫瑰红色 测定反应原理总结 基本知识 实验设计 乳酸菌发酵 定义 分类 分布 亚硝酸盐 操作提示 泡菜坛选择 腌制条件 泡菜的制作及亚硝盐检测 发酵原理 乳酸杆菌 乳酸链球菌 葡萄糖 乳酸 国家标准 危害 泡菜制作 亚硝酸盐含量测定 时间、温度、食盐用量、微生物 测定亚硝酸盐含量的操作 结果分析与评价 课堂小结 果酒 果醋 腐乳 泡菜 微生物类型 原理 反应条件 检测方法 酵母菌,真菌,兼性厌氧 醋酸菌,细菌,好氧菌 毛霉,真菌,好氧 乳酸菌,细菌,厌氧菌 酵母菌的无氧呼吸产生酒精 18~25 ℃,无氧 重铬酸钾与其反应呈灰绿色 醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸 30~35℃,通入氧气 品尝、pH试纸检测 毛霉产生蛋白酶和脂肪酶 15~18℃接种,酒精含量控制在12%左右 乳酸菌无氧呼吸产生乳酸 常温,无氧条件 pH检测,亚硝酸盐的检测方法 亚硝酸盐是一类常见的食品添加剂,能抑制肉毒杆菌的生长,色泽鲜嫩,为发色剂和防腐剂。 在细菌硝酸盐还原酶的作用下,硝酸盐被还原成亚硝酸盐。 亚硝酸盐本身并不致癌,但它与蛋白质代谢后产生的丰富胺类物质结合,形成的亚硝胺具有很强的致癌性。 硝酸盐可随水、腌肉、蔬菜、水果等进入人体。 多用抑制亚硝胺形成的食物,如大蒜、茶叶、富含维C的食物。 知识拓展 ①贮存过久的新鲜蔬菜、腐烂蔬菜及放置过久的煮熟蔬菜,此时原来菜内的硝酸盐在硝酸盐还原菌的作用下转化为亚硝酸盐; ②刚腌不久的蔬菜(暴腌菜)含有大量亚硝酸盐,一般于腌后10天后开始下降; ③有些地区饮用水中含有较多的硝酸盐,当用该水煮粥或食物,再在不洁的锅内放置过夜后,则硝酸盐在细菌作用下还原为亚硝酸盐; 中毒原因可包括几方面: ④食用蔬菜(特别是叶菜)过多时,大量硝酸盐进入肠道,若肠道消化功能欠佳,则肠道内的细菌可将硝酸盐还原为亚硝酸盐; ⑤腌肉制品加入过量硝酸盐和亚硝酸盐; ⑥误将亚硝酸盐当食盐加入食品; ⑦奶制品中含有枯草杆菌,可使硝酸盐还原为亚硝酸盐。 针对主要的中毒原因,可采取如下预防措施: ①蔬菜应妥善保存,防止腐烂,不吃腐烂的蔬菜; ②食剩的熟菜不可在高温下存放长时间后再食用; ②勿食大量刚腌的菜,腌菜时盐应多放,至少腌至15天以上再食用; ④不要在短时间内吃大量叶菜类蔬菜,或先用开水焊5分钟,弃汤后再烹调; ⑤腌肉制品中硝酸盐和亚硝酸盐用量要严格按国家卫生标准规定,不可多加; ⑥苦井水勿用于煮粥,尤其勿存放过夜; ⑦防止错把亚硝酸盐当食盐或碱面用。 练习 1.下列关于乳酸菌的叙述,不正确的是 A.乳酸菌的种类很多,常见的有乳酸链球菌乳酸杆菌 B.在自然界广发分布,空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内均有 C.乳酸菌是兼性厌氧菌,无氧时产生乳酸 D.乳酸菌是厌氧细菌,在无氧的条件下,将葡萄糖分解成乳酸 C 2.下列关于亚硝酸盐的叙述中,正确的是 A.亚硝酸盐为白色粉末,易溶于水,在食品生产中用作食品添加剂,可多加 B.绿色食品中不会含有亚硝酸盐 C.亚硝酸盐在人体胃肠内易变成亚硝胺 D.水煮越久亚硝酸盐含量越少 C 3.家庭制作泡菜时并无刻意的灭菌环节,在发酵过程中,乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长。当环境中的乳酸积累到一定浓度时,又会抑制乳酸菌自身的增殖。下列对这些现象的描述不正确的是 A.在发酵初期,泡菜坛内微生物的种内关系主要表现为种内互助 B.在发酵初期,泡菜坛内的发酵环境使乳酸菌在种间斗争中占据优势 C.随着发酵的进行,由于乳酸量的积累,种内斗争趋于激烈 D.发酵后期,泡菜坛内各种微生物的抵抗力维持在较高的水
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