第九章维生素的测定详解.ppt

②空白管冷至室温后加入0.1mL2％2，4－二硝基苯肼溶液，10～15min 后也放入冰水中。 ③向每支试管滴加 5mL85％硫酸，边加边摇动，滴加时间至少需要1min。加完硫酸后将试管从冰水中取出，室温下准确放置30min 后立即比色。 （三）2，4-二硝基苯肼法 ---- Vc总量 (4)比色：用1cm 比色杯以空白液调零点，于500nm 波长下测吸光值。 本步已成脎，但显色不稳定 用浓硫酸处理，转变为橘红色的双-2，4-二硝基苯 (5) 标准曲线的绘制 取5个50ml容量瓶编号 1???? 2???? 3???? 4???? 5 加VC标准液 10??? 20??? 30??? 40??? 50ml 取5个比色管取相应 ? 2???? 2???? 2???? 2???? 2 加硫脲溶液（滴）??? 1???? 1???? 1???? 1??? ? 1 2，4-二硝基苯肼（ml） 0.5?? 0.5??? 0.5?? 0.5??? 0.5????? 于37℃保温箱3小时，取出于冰浴中，然后滴加85%硫酸5ml→取出放30分钟→在500nm下，测各吸光值绘标准曲线，同时做空白。 计算：每百克食品中抗坏血酸的毫克数=C/W *100 （三）2，4-二硝基苯肼法 ---- Vc总量 3、注意事项 硫脲可以保护抗坏血酸不被氧化，并且能帮助 脎的形成。最终溶液中硫脲的浓度应一致，否则 影响色度。 试管从冰中取出后，样品中糖类的存在会造成 颜色逐渐加深，因此30分钟后准时比色。 活性C—氧化剂+脱色剂（深色样品） 无色或已脱色样品—溴或2，6二氯靛酚作氧化剂 课后习题： 1，说明三氯化锑比色法测定VA的原理。在测定VA时，皂化的目的是什么？VA与三氯化锑所形成的蓝色络合物稳定时间极短，应如何安排实验操作？测定前，为什么要往比色杯里加1滴乙酸酐？ 2、简述2，6-二氯靛青测定Vc应注意的问题。 3、测定食品中维生素有哪些方法？各有什 么优缺点？ 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 谢谢！ * 水溶性维生素B1、B2和C，广泛存在于动植物组织中，饮食来源充足。但是由于它们本身的水溶性质，除满足人体生理、生化作用外，任何多余量都会从小便中排出。为避免耗尽，需要经常由饮食来提供。 水溶性维生素B1、B2和C，广泛存在于动植物组织中，饮食来源充足。但是由于它们本身的水溶性质，除满足人体生理、生化作用外，任何多余量都会从小便中排出。为避免耗尽，需要经常由饮食来提供。 * * * * 说明： 1，本法为国家标准方法，适用于食品中维生素Ａ 的测定。 2，乙醚为溶剂的萃取体系，易发生乳化现象，在 提取前，洗涤操作中，不要用力过猛，若发生乳 化，可加几滴乙醇消除乳化。 3，所用氯仿中不应含有水分，因三氯化锑遇水会 出现深沉，干扰比色测定。故在每1mL氯仿中应 加入乙酸酐１滴，以保证脱水。 ４，由于三氯化锑与维生素Ａ所产生的蓝色物质很 不稳定，通常6s以后便开始褪色，因此要求反应在 比色皿中进行，产生蓝色后立即读取吸光度值。 5，如果样品中含β－胡萝卜素（如奶粉、禽蛋等 食品）干扰测定，可将浓缩蒸干的样品用正己烷溶 解，以氧化铝为吸附剂，丙酮－己烷混合液为洗脱 剂进行柱层析。 二、维生素D的测定 维生素D是指含有抗佝偻病活性的一类物质，又称钙化醇，是类固醇的衍生物，是一类关系钙、磷代谢的活性物质。具有维生素D活性的化合物约有10种，其中最重要的是维生素D2、维生素D3及其维生素D原。维生素D2无天然存在，维生素D3只存在于某些动物性食物中。但它们都可由维生素D原(麦角固醇和7一脱氢胆固醇)经紫外线照射形成。 维生素D2 药片吃多了中毒。 分析方法中较好的是比色法和高效液相色谱法。 (一)三氯化锑比色法 (二) 高效液相色谱法 它的灵敏度较比色法高30倍以上，且操 作 简便，精度高，分析速度快。是目前分 析维生素D的