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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( )
2015, 31 8 :82-87
大豆基因 GmGW2 的克隆与转化
1 1 2 1 2 2，3
熊鹤雯 吴志慧 段思宇 谢皓 秦玉涛 郭蓓
（1. 北京农学院植物科学技术学院，北京 102206 ；2. 北京农学院生物科学与工程学院，北京 102206 ；3. 农业部都市农业 ( 北方 ) 重点开放
实验室，北京 102206）
摘 要 ： GW2 编码一个环型E3 泛素连接酶，位于细胞质中，通过将其底物锚定到蛋白酶体进行降解，从而负调节细胞的分裂。
之前有文献报道GW2 位点突变可导致水稻籽粒大小的改变。根据水稻中GW2 基因序列，在GenBank 中找到与之同源的大豆基因
序列GmGW2 ，克隆目的片段并进行了生物信息学分析。构建转化载体pCAMBIA1300 ∷GmGW2 ∷EYFP，并对大豆品种中黄10 进
行转化。利用含有重组载体的农杆菌EHA105 侵染萌发24 h 的中黄10 幼胚。当外植体长出3 片复叶后，提取基因组DNA，对报
告基因EYFP 进行PCR 检测。得到的阳性株在激光共聚焦显微镜下观察，EYFP 蛋白含量显著增加，实验结果显示目的基因已转
化成功。序列分析表明GW2 基因与苜蓿，鹰嘴豆中的GW2 基因具有较高的同源性。
关键词 ： GmGW2 ；大豆；系统进化树；遗传转化 ；EYFP
DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.08.012
Cloning and Transformation of Gene GmGW2 in Soybean
1 1 2 1 2 2，3
Xiong Hewen Wu Zhihui Duan Siyu Xie Hao Qin Yutao Guo Bei
（1. College of Plant Science and Technology ，Beijing 102206 ；2. College of Biological Science and Engineering ，Beijing University of
Agriculture ，Beijing 102206 ；3. Key Laboratory of Urban Agriculture （North ）of Ministry of Agriculture China ，Beijing 102206 ）
Abstract: GW2 encodes a previously unknown RING-type protein with E3 ubiquitin ligase activity, which is located in cytoplasm. It is
known to function in the degradation by the ubiquitin-proteasome pathway. Loss of GW2 function increased cell numbers. It was reported that
the mutation of GW2 lead to change the size of rice seeds. According to rice GW2 gene sequence, blast in the NCBI, we found a s
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