改善液体辅助表面解吸常压化学电离质谱成像空间分辨率的研究.docVIP

改善液体辅助表面解吸常压化学电离质谱成像空间分辨率的研究 　　摘 要 液体辅助表面解吸常压化学电离源（LA-DAPCI）通过电晕放电产生的初级离子和高密度带电液滴，能够对样品表面的中性待测物进行解吸电离，该离子源具有较高的离子化效率，适合复杂基体样品的质谱成像研究。为了满足质谱成像对空间分辨率的要求，本实验通过优化离子源结构、萃取剂组成、萃取剂流量、载气流速、离子源的几何位置参数等实验条件，有效提高了LA-DAPCI源的空间分辨率（从（441±14） μm提高到（58±7） μm）。应用LA-DAPCI-MS/MS方法对罗丹明6G进行测定，检测限为0.01 ng/cm2，实验结果令人满意，为其应用于复杂基体样品的质谱成像研究提供科学依据。 中国论文网 /8/view-7206846.htm 　　关键词 表面解吸常压化学电离； 空间分辨率； 质谱成像 　　1 引 言 　　表面解吸常压化学电离源（Surface desorption atmospheric pressure chemical ionization， DAPCI）是一种直接离子化技术。DAPCI源通过电晕放电产生初级离子，通过分子离子反应传递电荷和能量，使样品中的待测物电离[1～3]。DAPCI与低温等离子体（Low-temperature plasma， LTP）探针[4，5]、空气动力辅助离子化技术（Air flow assisted ionization， AFAI）[6]等技术类似，也可用于表面质谱成像研究[7～10]。前期研究获得的DAPCI质谱成像的空间分辨率分别为250 μm×250 μm[7]，450 μm×450 μm[8]，140 μm×140 μm[9]和500 μm×500 μm[10]。 　　液体辅助表面解吸常压化学电离源（Liquid assisted-surface desorption atmospheric pressure chemical ionization， LA-DAPCI）是一种改进型的DAPCI离子源[11]。LA-DAPCI一方面通过电晕放电的形式产生高密度试剂离子，用于对样品的电离和使喷雾雾滴带电；另一方面通过喷雾液滴对待测表面的碰撞、萃取等作用，增加DAPCI解吸能力，适用于对大分子[12]和基体吸附强度较高的待测物[13]的解吸电离，尤为适合组织切片等复杂基体样品的质谱成像研究。离子源的空间分辨率直接关系到质谱成像的质量和图像清晰度[14，15]。因此LA-DAPCI源用于质谱成像实验，需要满足一定的空间分辨率要求。 　　本研究通过观察并测量离子源作用于样品表面的解吸电离区域，优化毛细管直径、喷口处两层毛细管和放电针的相对位置、萃取剂组成和流速、载气流速、离子源的几何位置等参数，达到提高LA-DAPCI源的空间分辨率和解吸能力的目的，旨在满足质谱成像研究对离子源空间分辨率的要求。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器、试剂与材料 　　LTQ-XL增强型离子阱质谱仪（美国Finnigan公司），配有Xcalibur 数据处理系统；电移台及SC系列步进电机控制器（北光世纪仪器有限公司），配有绝缘样品承载台；中空纤维过滤器（美国Thermo Scientific公司）；LA-DAPCI离子源（东华理工大学自主研制[16]）。 　　罗丹明6G（含量95%，SIGMA公司）；超纯水（Barnstead Nanopure，18.2 MΩcm， Thermo Scientific公司）；甲醇（HPLC级，ROE Scientific Inc公司）。pH试纸（B-广泛试纸， 上海三爱思试剂有限公司）； 定性滤纸（抚顺市民政滤纸厂）。 　　2.2 实验条件 　　离子源：载气（N2）压力0.8～1.6 MPa、萃取剂为甲醇/水溶液，萃取剂流速1～5 μL/min，离子源放电针与水平面夹角为30°～65°，放电针针尖到质谱进样口的距离为3～8 mm，放电针针尖到待测样品表面距离0.5～3.0 mm。 　　正离子扫描模式，离子源电压4.5 kV，质量扫描范围m/z 120～500，离子传输管温度为150℃，其它参数由系统自动优化。在LA-DAPCI-MSn扫描时，母离子选择宽度为1.0 Da，碰撞能量为20%。 　　2.3 实验方法 　　用罗丹明6G溶液（1 μg/mL）浸湿滤纸条，让滤纸自然晾干，用双面胶粘在载玻片上，保持平整。将载玻片固定在三维移动平台上，置于离子源下，沿三维移动平台的x方向（垂直于罗丹明6G带状区域边界的方向）移动进样，移动速率1.492 mm/min，并记录特征碎片离子m/z 415的离子流图。 　　3 结果与讨论 　　3.1 解吸电离区域的观察 　　LA-DAPCI源产生的喷雾