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黄瓜表皮细胞的表型鉴定与遗传规律分析 　　摘 要 黄瓜果实表皮细胞的排列呈现两种不同的形状：栅栏型与扁平型。对两种表型的特点进行显微结构观察分析并用遗传学的方法解释两种性状出现的原因。本研究运用显微镜观察4种不同生态型黄瓜的果实表皮细胞的结构并确认具有扁平型和栅栏型的瓜种并利用这两种类型的黄瓜材料构建遗传群体进行遗传规律分析。结果表明除美国加工型黄瓜之外另外几种黄瓜果实表皮细胞均为扁平型。遗传学研究表明栅栏型表皮细胞性状为显性单基因控制。有研究表明果实表皮细胞的排列与植物的耐旱、抗病虫害等生物和非生物胁迫具有一定关系，因此推测栅栏型表皮细胞可能与适应缺水或病虫多发环境相关。 中国论文网 /8/view-7243578.htm 　　关键词 黄瓜果实表皮细胞 遗传分析 栅栏型 扁平型 　　中图分类号 Q-331 文献标志码 B 　　黄瓜在中国的栽培历史悠久，自从印度传入中国后，就开始大面积种植。现在黄瓜作为中国的主要作物在蔬菜市场中占据重要的地位。但是在当今学界对黄瓜表皮细胞的研究却不是那么的全面，大多数研究局限在表皮毛和表皮与抗病性的关系。现在已经可以初步确定，表皮的厚度与抗病性有直接关联。经过观察发现不同种类黄瓜的表皮细胞排列有不同的表现型，目前主要分为两大类：栅栏型和扁平型，其中栅栏型表皮细胞垂直于瓜体排列紧密，与扁平型的表皮细胞有极大的区别。有关于黄瓜表皮细胞类型基因的研究以前基本没有，大多数研究把重点放在表皮毛和刺瘤上，组织学观察发现黄瓜表皮毛和果刺均为多细胞非腺体的柱状结构。在其他的研究里也可以初步明确，黄瓜品种对黑星病菌具有结构抗病性，果实的抗病性与其表皮的厚度有关。本研究主要着重于对黄瓜果实的表皮细胞的结构排列进行观察，并对该性状进行遗传分析。这种特殊的表皮细胞结构极有可能与抗病性或者耐寒性有关。本研究结果将有助于明确控制果皮细胞类型基因的遗传规律及其与耐旱、抗病虫害等生物和非生物胁迫的关系，为该基因的进一步研究利用打下基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料 　　实验材料为4种不同生态类型的黄瓜材料及其利用美国加工类型P1与欧洲型黄瓜P2配制的F2代遗传群体。各种类型黄瓜的性状如下： 　　美国加工型黄瓜（图1A）：表皮较厚，果皮呈黄色或黄绿色，瘤稀，果刺稀少。 　　华南类型黄瓜（图1B）：表皮较薄，瘤稀，刺稀，果皮绿色。 　　华北类型黄瓜（图1C）：表皮厚度中等，瘤多，刺多，果皮深绿色。 　　野生黄瓜（图1D）：表皮较厚，刺多瘤多，果实绿色。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 显微镜观察表皮细胞排列 　　于盛瓜期采摘的商品瓜，要求大小一致，采摘后置于保鲜袋中。然后制作切片进行显微镜观察。具体制作步骤如下： 　　（1） 切片制作： 　　① 用水将刀片润湿，用刀片从中部将瓜横切成两部分，右手拿刀片，左手拿黄瓜，刀片保持和黄瓜切面平行。 　　② 以均匀的力量和平稳的动作使刀刃自左前方向右后方斜滑拉切，注意不要直切，中途不停顿，拉切速度要快，不要推前拖后（拉锯式）切割，左手食指向下稍微移动，使材料略有上升，从而调动每张切片的厚度。 　　③ 将切下的切片用毛笔刷蘸水从刀片上轻轻移入培养皿的清水中或直接将刀片浸没于水中使切片漂洗下来。尽量使切下的黄瓜表皮不在水中翻折或者相互重叠，以免影响观察时的效果。 　　（2） 临时装片制作。 　　在载玻片中央，滴加1、2滴清水，选取表皮边缘透明的薄片将平铺在载玻片上，用解剖针展开，将盖玻片轻轻盖上，盖盖玻片时，用镊子夹起盖玻片，使载玻片一边先放下，接触一边水，然后再轻轻放平，以免水中产生气泡，影响观察。 　　（3） 观察。 　　先用低倍镜（25×10）观察表皮细胞的排列形式及其结构，再在高倍镜（25×40）下观察。 　　1.2.2 遗传规律分析 　　于盛瓜期采摘商品瓜，按照同上方法观察两亲本、F1和240株F2群体的表皮细胞排列，每株至少调查2个标准商品瓜，对不确定的单株进行多次调查，以确保结果的准确性。统计栅栏型和扁平型表皮细胞和数据，并计算分离比，使用 Microsoft Excel 2003软件进行数据统计分析及卡方测验。 　　2 结果与分析 　　2.1 不同类型黄瓜显微镜观察表皮细胞排列 　　根据显微镜下的观察，发现所有四种常见黄瓜中只有美国加工型黄瓜的果实表皮细胞呈现出了栅栏型，而其他三种黄瓜均为扁平型。结果见图2： 　　美国加工型黄瓜（图2A）； 　　华南类型黄瓜（图2B）； 　　华北类型黄瓜（图3C）； 　　野生黄瓜（图4D）。 　　2.2 遗传分析结果 　　遗传学分析表明，在将栅栏型果实表皮细胞的美国加工型黄瓜和扁平型果实（图3）表皮细胞的黄瓜作为亲本进行的杂交实验中，F1的全部20株黄瓜上的果实