模式动物小鼠分析报告.pptVIP

* 乳腺干细胞研究 * 上海史莱克实验动物有限公司 / 南京大学模式动物研究所 /?sortid=67 北京维通利华实验动物技术有限公司 / Jackson Lab / Harlan / * 引物设计 从以下10个小鼠基因中任选3个基因设计进行荧光定量PCR的特异引物。 actin, Actr10, CD24,CD49f, FoxA1,Lmo4,Elf5,Lgr5, Axin2,Sca1 * Primer ID gene Sequence Product length Acession No. 1 m-csf3-F CCTGGAGCAAGTGAGGAAGAT 181bp NM_009971.1 2 m-csf3-R CTGGCTTAGGCACTGTGTCT * All You Need is Love: Reproductive Biology of Mice We regret that you were unable to attend our webinar. Below are web links to the?recording and presentation slides for this webinar to view at your own convenience: /p4coc18z1hq/ /webinar/Mouse_Reproductive_Biology_091814.pdf * * X-chromosome-specific gene Jarid1c Y-chromosome-specific gene Jarid1d Exon9-10 high degree sequence similarly JaridId JaridIc BioTechniques 38:702-706 (May 2005) * 乙醚吸入麻醉 适用于各种动物的麻醉， 简单安全，可随时调节麻醉深度。 腹腔注射麻醉 可使用戊巴比妥钠 、水合氯醛等 常用标记，两种染料（苦味酸和中性红或品红） 先左后右，先上后下 * 穿耳孔法 左耳代表十位，右耳代表个位 应注意防止孔口愈合，多使用消毒滑石粉涂抹在打孔局部 * * 原则： 同一实验中，实验动物的年龄尽可能一致，实验动物体重大致相近； 同组、同性别动物体重差异应小于平均体重的10%；不同组间同性别动物体重均值差异小于5%；♀♂动物各半，且♀♂实验结果分开统计、分析。 称重 编号 随机分组 * 经口染毒（喂饲、灌胃、吞咽胶囊等） 经呼吸道染毒（静式、动式和气管内注入） 经皮肤染毒 注射染毒（皮下、皮内、肌内、腹腔和鼠尾静脉注射等） 其它（直肠内、鼻腔等） * 抓取老鼠时应是鼠 成竖直线 灌胃成功时，所遇阻力较小 灌胃时注意胃容量 0.1ml/10g-0.3ml/10g ，＜1mL * 腹下1/3外侧，避免损伤实质器官 30-45°角刺入 扎入时有“落空感”，回抽无尿液或血液 * 酒精擦拭尾部 左手食指，拇指配合按住尾端 右手持注射器，针尖轻轻抬起与血管平行刺入 血管由红变白，按压止血 * 俯卧固定，左手拇指和食指捏住颈背部皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮下，进针时感觉有阻力，继续刺入，突然阻力消失，活动针头，确认刺入皮下即可注射药液。 * 俯卧保定，与皮肤平行刺入捏住的皮肤，注射部位局部形成皮丘。为避免药液流出，停留片刻，再将针头拨出 * 血液采集（断尾采血、眼眶采血、动脉采血等） 尿液采集 粪便采集 * 固定→用手轻揉鼠尾→静脉充血后剪尾尖（1-2mm）→用手从尾根向尾尖推挤→采血→干棉止血。每次0.1mL * 左手固定动物→滴少量10%可卡因于动物眼内→右手持消毒过毛细吸管→以抗凝剂湿润内壁→眼睑和眼球间旋转刺入→采血后消毒纱布止血30秒。每次0.2-0.3mL * 动物仰卧→固定器固定→剪左侧心区毛→ 皮肤消毒→小号针头注射器在3-4肋间刺入。可达0.5mL * 脊椎脱臼法：用左手按住动物的头部于实验台上，右手抓住尾根部，快速、不间断地向后、略向上使劲拉，使动物的颈椎以致脊椎脱臼死亡。 过量麻醉法 * 将动物固定于解剖台上，从耻骨联合至下颌沿正中线切开皮肤，再从耻骨联合至肋骨下缘沿腹正中线切开腹壁肌肉（不要用力过猛，以免切破腹腔脏器，特别是膀胱）。从肋骨下端向脊柱方向，将两侧腹壁剪开，以便观察腹腔内脏器。应注意不可将腹腔内脏器翻乱，应有次序地检查。 * * * * * * * * Tissue Collection for Systematic Phenotyping in the Mouse ,Current Protocols in Molecular