糖尿病的分子机制(病理班)要点.ppt

什么是胰岛素抵抗 IR是指机体在一定量的胰岛素水平作用下,葡萄糖摄取和处理能力降低,肌细胞和脂肪细胞不能利用糖,以及肝细胞不能有效抑制糖原分解和糖异生,而向血中释放过多葡萄糖,致使血糖浓度增高。 (1)从胰岛素基因水平 炎症应激 氧化应激 一·实验目的 进一步寻找新的目的基因 二·实验原理 有方向：根据已有的方向进一步深入 无方向：用基因芯片的方法高通量筛选 科研的基本方法 伽利略：问题 提出猜想 设计实验方案 修正假说 结果对比 实验验证 （一）立题 提出问题：该往哪个方向研究？ 是围绕胰腺展开 直面疾病 还是舍而取其次转攻其他相关的器官？ 文献查询：胰腺 肾脏 原则： 实用性：有一定的临床研究价值 可行性：在实验中不超过现有的实验条件 科学性：尽量根据已有的一些研究成果缩小一下目标范围 先进性：采用交心的前沿的技术和方法，以较先进的理论 作为研究的指导 三 实验设计 根据一中筛选的可疑基因， 通过查询相关文献进一步去除已知的基因 筛选出新的可疑基因 再按可疑度的高低逐个依次研究 于是问题到这一步转化成了：如何确定找到一个可疑的基因是否为致病基因 1·比较该基因在不同物种之间的分布 原因：人和实验动物（如老鼠）毕竟是不同的， 有些基因实验动物有而人没有， 因此对人类而言也没有进一步的临床意义 关于如何符合： 可以分不同的层次展开 1·细胞水平：对人类某些组织细胞进行离体培养， 对某些基因进行操作（如基因的敲除、沉默、 低表达、过表达） 观察其对细胞的影响 2·个体水平：小鼠 猴子 猩猩 验证思路 实例： 1.材料： 2.细胞培养： 5% CO2 33摄氏度 3.细胞分组 4.western blotting 检测 NICIDI 的表达 5.统计学处理 展望： 分子生物学家： 在我心中，有一个梦，能用基因治疗所有的痛； 万千基因，谁是真的元凶，愿患者生命从此与过往不同； 分子魂，基因梦，魂牵梦萦是动力的泵。 2）受体水平 胰岛素受体基因的突变以及胰岛素受体抗体的产生导致胰岛素抗体 基因突变对受体功能的影响： ① 受体合成时mRNA提前终止 受体合成率，数目 ② 胰岛素受体蛋白合成受阻 细胞膜受体数量 ③ 受体降解加速 ④ 受体酪氨酸酶活性降低 ⑤ 受体再利用障碍 ⑥ 受体与胰岛素的亲和力下降 胰岛素受体基因突变，引发胰岛素受体缺陷，从而导致胰岛素抵抗，此时胰岛素B细胞代偿性分泌大量胰岛素，形成高胰岛素血症，持续高胰岛素血症进一步降低胰岛素的生物效应，由此恶性循环。 （2）从胰岛素受体水平 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 1 2 3 4 5 6 789 10 11 12 13 14 21 22 胰岛素结合区 富含半胱氨酸区域 选择性可剪切外显子 前受体胯加工区 酷氨酸激酶 信号肽 外显子 胰岛素受体基因结构图 编码受体的基因改变 胰岛素受体基因突变导致正常受体数量减少：受体降解加速：受体酪氨酸酶活性降低：受体再利用障碍：受体与胰岛素的亲和力下降从而导致胰岛素抵抗，此时胰岛素β细胞代偿性分泌大量胰岛素，形成高胰岛素血症，持续高胰岛素血症进一步降低胰岛素的生物效应，由此恶性循环。 2000 3）受体后水平 胰岛素受体底物（IRS），葡萄糖运载体（Glut），