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第4章蛋白质的共价结构(下)
第四节 蛋白质一级结构的测定(二)
八、二硫桥位置的确定
用对角线电泳法:
九、蛋白质测序举例(胰岛素的序列测定)
十、蛋白质序列数据库
欧洲生物信息中心研究所和瑞士生物信息研究所共同管理的SWISS-PROT 有10 多万条肽链的信息。
美国国家生物医学基金会主持的PIR 有近30 万条肽链的信息,但多数由核酸信息翻译而来,有些未经严格检验。
美国政府支持的Gen Bank 和欧洲的EMBL 有大量的基因序列信息,从其阅读框可以得到蛋白质序列的不少信息。
第五节 蛋白质的氨基酸序列与生物功能
一、同源蛋白质的物种差异与生物进化
细胞色素C 的物种差异。
二、同源蛋白质具有共同的进化起源
血红素蛋白与肌红蛋白
三、血液凝固与氨基酸序列的局部断裂
12 种蛋白质凝血因子有7 种是丝氨酸蛋白酶。
血液凝固中的级联过程:
与Ca2+结合促进凝血酶原与血小板膜结合,起始凝血酶原的激活。
第六节 肽与蛋白质的人工合成
一、肽的人工合成
(一)跌氮法
由小肽进一步缩合成大肽时,经常用叠氮法。此法不引起消旋,因此产物的光学程度较高。
(二)活化脂法
氨基被保护的氨基酸对硝基苯脂(一种活化脂)能与另一个氨基酸的氨基缩合成肽。此法作用温和,产率较高。
(三)混合酸酐法
氨基被保护的氨基酸,在低温且有叔胺(NR3)的存在下与氯甲酸乙脂生成混合酸酐,能与另一氨基酸脂缩合成肽。缺点是容易产生消旋,但在无水溶剂中消旋可以保持较低水平。
二、固相肽合成
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