饲料中伏马毒素的测定 免疫亲和柱-荧光光度法.docVIP

饲料中伏马毒素的测定 免疫亲和柱-荧光光度法 伏马毒素是由串珠镰刀菌等产生的真菌毒素，可导致马产生白脑软化症（ELEM），神经性中毒而呈现意识障碍、失明和运动失调，甚至造成死亡；对猪产生肺水肿综合症（PPE），并可能诱发人类的食道癌等疾病，从而对畜牧业及人类的健康构成威胁。目前已知有7种衍生物。伏马毒素检测方法主要有免疫亲和柱-荧光法、免疫亲和柱-HPLC法、毛细管电泳法、液相/质谱法等。 伏马毒素的免疫亲和柱-荧光法是将样品与提取液混合、均匀、过滤，然后将滤液通过键合有伏马毒素特殊抗体的FumoniTest分离柱。此时，伏马毒素键合在分离柱中的抗体上。用蒸馏水将免疫亲和柱上的杂质除去。用淋洗液通过分离柱，将伏马毒素从抗体上分离下来。最后，将淋洗液注入荧光计进行测定，并可通过高效液相色谱（HPLC）进行准确定量和确认。本文旨在探讨利用免疫亲和柱-荧光法检测饲料中伏马毒素的方法性能。 1材料与方法 1.1 试剂 1.1.1 甲醇：色谱纯。 1.1.2 甲醇+水（8+2）。 1.1.3 氯化钠。 1.1.4 PBS缓冲溶液：称取8.0g氯化钠，1.2g磷酸氢二钠，0.2g磷酸二氢钾，0.2g氯化钾，用990mL纯水溶解，然后用浓盐酸调节pH值到7.0，最后用纯水稀释至1000mL。 1.1.5 吐温-20/PBS溶液（0.1%）：取1mL吐温-20，加入PBS缓冲溶液并定容至1000