酶类药物教材.ppt

酶类药物 酶类药物 一.酶类药物的概述 二.酶类药物的提取和纯化 三.重要酶类药物的制备 酶是生物体内具有生物催化活性的生物大分子，包括蛋白质和核酸等。 绝大多数酶的本质是蛋白质或蛋白质与辅酶的复合体。 由于酶专一性强及催化效率高，使其在疾病的治疗等方面具有针对性强，疗效高等特点。 ?一、药用酶类的概述 （一）酶的特性 酶是由活细胞产生的具有特殊催化 功能的一类蛋白质。其特点： ①催化效率高 ②专一性强 ③反应条件温和 ④催化活性受到调节和控制 目前，从生物界已发现2000多种酶。 其中：工业用酶约50～60余种； 治疗和诊断用酶120多种； 试剂酶300多种； 基因工程工具酶100多种。 一、药用酶的分类及应用 （一）促进消化酶类 （二）消炎酶类 （三）与治疗心脑血管疾病有关的酶类 （四）抗肿瘤的酶类 （五）与生物氧化还原电子传递有关的酶 （六）其他药用酶 1、促进消化酶类 这类酶的作用是水解和消化食物中的成分，如蛋白质、糖类和脂类等。 最早使用的医用酶，包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶等水解酶。 目前已从微生物制的不仅能在胃中、同时也能在肠中促进消化的复合消化剂，内含蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶等。 2、消炎酶类 蛋白酶的消炎作用已为实验所证实，从而促进了蛋白酶作为消炎剂的开发。如临床上采用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、菠萝半袋没等治疗炎症和浮肿疾患，清除坏死组织等。 消炎酶一般做成肠溶性片剂。 3、溶血纤维蛋白酶类 这类酶的作用是防止血小板凝集、阻止血纤维蛋白形成或促进其溶解。 已应用于临床的主要有链激酶、尿激酶、纤溶酶、凝血酶等。 4、抗肿瘤酶 能治疗某些肿瘤，如L-天冬酰胺酶可用于治疗白血病。 谷氨酰胺酶、精氨酸酶、丝氨酸脱水酶、苯丙氨酸氨解酶和亮氨酸脱氢酶等也具有抗肿瘤活性。 5、其他药用酶 如青霉素酶能分解青霉素，可应用于治疗青霉素引起的过敏反应 超氧化物歧化酶可消除超养负离子、防止脂质过氧化，在抗衰老、抗辐射、消炎等方面有显著疗效 葡聚糖酶和右旋糖酐酶能预防龋齿等 一.酶类药物的原料来源 (一) 原料选择 选料应注意一下几点: (1) 不同酶的原料选择 (2) 注意不同生长发育情况及营养状况 (3)从原料来源是否丰富考虑 (4)从简化提纯步骤着手 (5) 如用动物组织做材料,则此动物宰杀后应 立即取材 一.酶类药物的原料来源 (二) 微生物酶制剂高产菌株的选育 优良菌种的获得有三条途径: 1.从自然界分离筛选; 2.用物理或化学方法处理,诱变; 3.用基因重组与细胞融合技术; 一.酶类药物的原料来源 (三) 微生物酶制剂生产的发酵技术 首先要合理选择培养方法,培养基,培养温度,PH和通气量等,在工业生产中还要摸索一系列工程和工艺条件,如培养基的灭菌方式,种子培养条件等.还要研究酶的分离提纯技术和制备工艺,这些条件的综合结果将决定酶生产本身的经济效益. 二.酶类药物的提取和纯化 (一) 生物材料的预处理 1.动物材料的预处理 (1) 机械处理 用绞肉机将事先切成的组织绞碎. (2) 反复冻融 冻到-10度左右,在缓慢溶解至室温,如此反 复多次. (3) 丙酮粉 组织经丙酮迅速脱水干燥制成丙酮粉,可在低温下保存 几年. 二.酶类药物的提取和纯化 2.微生物的预处理 要是酶是胞外酶,则可除去菌体后再直接从发酵液中吸附取酶.但对胞内酶则需破壁,制成无细胞的悬液后再行提取. 通常用离心或压滤的方法取得菌体,用生理盐水洗涤后除去培养基后,应深冻保存,有时为了大量保存或有利于提取,可采用干燥法.因为干燥法能导致细胞自溶,增加酶的释放,从而在后处理中破壁不必太剧烈就能到达预期目的. 二.酶类药物的提取和纯化 (1) 干燥法 ① 空气干燥 特别适合于酵母,当其中由于喷雾干燥法的温度较高,对热稳定性差的酶不适用. ② 真空干燥 此法对细菌特别适用.对敏感性的酶,应加入少量还原剂保护酶. ③ 冷冻干燥 对较敏感的酶宜用此法. 二.酶类药物的提取和纯化 (2) 机械法 常用的方法有研磨法,组织匀浆法,超声波法,高速匀浆法等. (3) 酶法处理 用的最多的是溶菌酶,也可用脱氧核糖核酸酶处理 二.酶类药物的提取和纯化 (二) 酶的提取 提取方法主要有水溶液法,有机溶剂法和表面活性剂法 1.水溶液法 常用稀盐溶液或缓冲液提取.为了防止提取过程中酶活力降低,一般在低温下操作,但对耐高温的酶,应提高温度,是杂蛋白变性,以利于酶的提