DNA的多态性摘要.ppt

DNA的多态性 DNA多态性是指染色体DNA等位基因中核苷酸排列的差异性。 生物群体基因多态性现象十分普遍，其中，人类基因的结构、表达和功能，研究比较深入。人类基因多态性既来源于基因组中重复序列拷贝数的不同，也来源于单拷贝序列的变异，以及双等位基因的转换或替换。按引起关注和研究的先后，通常分为3大类:DNA片段长度多态性、DNA重复序列多态性、单核苷酸多态性。 DNA片段长度多态性 DNA片段长度多态性(FLP)，即由于单个碱基的缺失、重复和插入所引起限制性内切酶位点的变化，而导致DNA片段长度的变化。又称限制性片段长度多态性，这是一类比较普遍的多态性。 DNA重复序列多态性 DNA重复序列的多态性(RSP)，特别是短串联重复序列，如小卫星DNA和微卫星DNA，主要表现于重复序列拷贝数的变异。小卫星(minisatellite)DNA由15~65bp的基本单位串联而成，总长通常不超过20kb，重复次数在人群中是高度变异的。这种可变数目串联重复序列(VNTR)决定了小卫星DNA长度的多态性。 单核苷酸多态性 单核苷酸多态性(SNP)，即散在的单个碱基的不同，基因组中单核苷酸的缺失,插入与重复序列不属於SNP，但更多的是单个碱基的置换，在CG序列上频繁出现。这是目前倍受关注的一类多态性。 1. 限制性片段长度多态性（Restriction Fragment Length Polymorphism）:由DNA的多态性，致使DNA分子的限制酶切位点及数目发生改变，现在多采用PCR-RFLP法进行研究基因的限制性片段长度多态性. 2．单链构象多态性（SSCP）：是一种基于单链DNA构象差别的点突变检测方法。多用于鉴定是否存在突变及诊断未知突变。 3．PCR-ASO探针法（PCR-allele specific oligonucleotide, ASO）：即等位基因特异性寡核苷酸探针法。 4. PCR-SSO法：SSO技术即是顺序特异寡核苷酸法（Sequence Specific Oligonucleotide, SSO）。原理是PCR基因片段扩增后利用序列特异性寡核苷酸探针，通过杂交的方法进行扩增片段的分析鉴定。 5. PCR-SSP法：序列特异性引物分析即根据各等位基因的核苷酸序列，设计出一套针对每一等位基因特异性的（allele-specific）、或组特异性 (group-specific)的引物，此即为序列特异性引物（SSP）。 6. PCR-荧光法：用荧光标记PCR引物的5’端，荧光染料FAM和JOE呈绿色荧光，TAMRA呈红色荧光，COUM 呈兰色荧光，不同荧光标记的多种引物同时参加反应。 7. PCR-DNA测序：是诊断未知突变基因最直接的方法，由于PCR技术的应用，使得DNA 测序技术从过去的分子克隆后测序进入PCR直接测序。 8. PCR指纹图法（PCR-fingerprints）：实用于快速的同种异型DR/Dw配型。 9.?基因芯片法：又称为DNA 微探针阵列（Micro array）。 基因型与发病率：通过对基因多态性与疾病的易感性的联系研究，可阐明人体对疾病、毒物和应激的易感性。就是从基因水平揭示人类不同个体间生物活性物质的功能及效应存在着差异的本质。 药物代谢与致病基因：致病基因的多态性使同一疾病的不同个体，在其体内生物活性物质的功能及效应出现差异，即疾病基因多态性影响药物代谢的过程及清除率，导致治疗反应性上悬殊，从而影响治疗效果。 多态性导致遗传疾病：重复序列多态性作为遗传病的病因，如CCG，CTG和CAG这样的三核苷酸重复序列，当其拷贝数过度增高时可以引起强直性肌营养不良等。点突变引起的疾病:从镰刀状细胞贫血开始，突变引起各种遗传病的例子愈来愈多，遗传性肿瘤也逐渐被认识。 多态性适于遗传标记：绝大多数DNA多态性并不引起遗传病，反而可作为遗传标记来使用。例如:包括FLP位点、微卫星和小卫星DNA等各种多态性标记，都已广泛用于遗传病的连锁诊断。 法医物证学 基因诊断 基因治疗 物种鉴别 个体鉴别 * * DNA多态性的分类 DNA多态性的分类 DNA多态性的检测 DNA多态性的检测 DNA多态性的检测 基因多态性的医学意义 基因多态性的医学意义 基因多态性的医学意义 *