第二章微生物发酵产酶ppt.ppt

Chapter 2 The production of Enzyme by Fermentation of Microorganism 微生物发酵产酶 Contents of chapter 2 微生物发酵产酶 酶的发酵生产：经过预先设计，通过人工操作，利用微生物的生命活动，获得所需的酶的技术过程。 大多数酶的生产采用发酵生产→原因：微生物具有种类多、繁殖快、易培养、代谢能力强等特点 微生物发酵产酶 优良的产酶微生物具备的条件： （1）酶的产量高； （2）产酶稳定性好； （3）容易培养和管理； （4）利于酶的分离纯化； （5）安全可靠、无毒性等。 微生物发酵产酶 酶的发酵生产的方式： 固体培养发酵 液体深层发酵 固定化微生物细胞发酵 固定化微生物原生质体发酵 微生物发酵产酶 酶生物合成的基本理论 蛋白类酶和核酸类酶→酶的生物合成主要是指细胞内RNA和蛋白质的合成过程. 合成过程: 酶的基因（DNA）→（转录）→RNA →（翻译）→多肽链→（加工、组装）蛋白质 酶生物合成过程 The biosynthesis process of Enzyme 1、中心法则-Central Dogma 2、RNA的生物合成(转录)- Transcription 3、蛋白质的合成(翻译)-Translation 酶生物合成的调节 原核生物中酶生物合成的调节机制 原核生物中酶生物合成的调节主要是转录水平的调节 雅各（Jacob）和莫诺德（Monod）于1960年提出的操纵子学说（Operon theory）来阐明的。 酶生物合成的调节 原核生物中酶生物合成的调节机制 操纵子学说概述 操纵子（Operon）：是基因表达和控制的一个完整单元，其中包括结构基因，调节基因，操纵基因和启动基因。 酶生物合成的调节 原核生物中酶生物合成的调节机制 操纵子学说概述 启动基因（Promoter gene）：由两个位点组成，一个是RNA聚合酶的结合位点，另一个是环腺苷酸（cyclic AMP, cAMP）与CAP组成的复合物 ( cAMP-CAP) 的结合位点。 操纵基因（Operator gene）：与调节基因产生的变构蛋白（阻遏蛋白）中的一种结构结合，从而操纵酶生物合成的时机和合成速度。 酶生物合成的调节 原核生物中酶生物合成的调节机制 操纵子学说概述 调节基因（Regulator gene）: 产生一种阻遏蛋白。阻遏蛋白是一种由多个亚基组成的变构蛋白，它可以通过与某些小分子效应物（诱导物或阻遏物）的特异结合而改变其结构，从而改变它与操纵基因的结合力。当阻遏蛋白与操纵基因结合时，由于空间排挤作用，RNA聚合酶就无法结合到启动基因的位点上，也无法进行结构基因的位置进行转录，酶的生物合成也就无法进行。 酶生物合成的调节 原核生物中酶生物合成的调节机制 操纵子学说概述 结构基因（Strutural gene）：结构基因与多肽链有各自的对应关系。结构基因上的遗传信息可以转录成为mRNA上的遗传密码，再经翻译成为酶蛋白的多肽链，每一个结构基因对应一条多肽链。 酶生物合成的调节 原核生物中酶生物合成的调节机制 操纵子学说概述 诱导型操纵子（Inducible operon）—大肠杆菌乳糖操纵子 酶生物合成的调节 原核生物中酶生物合成的调节机制 操纵子学说概述 阻遏型操纵子（Repressible operon）—色氨酸操纵子 ( Trp operon ) 色氨酸操纵子(tryptophane operon)负责色氨酸的生物合成，当培养基中有足够的色氨酸时，这个操纵子自动关闭，缺乏色氨酸时操纵子被打开，trp基因表达，色氨酸或与其代谢有关的某种物质在阻遏过程（而不是诱导过程）中起作用。 酶生物合成的调节 真核生物酶生物合成的调节 目前为止，还没有统一的理论和模型来阐述真核生物酶生物合成的调节规律。 常见产酶微生物 Common microorganism in Enzyme Production 基本要求： 不是致病菌 发酵周期短,产酶量高 不易变异退化 最好是产生胞外酶的菌种,利于分离。 对医药和食品用酶,还应考虑安全性： 凡从可食部分或食品加工中传统使用的微生物生产的酶,安全! 由非致病微生物制取的酶,需作短期毒性实验。 非常见微生物制取的酶,需做广泛的毒性实验,包括慢性中毒实验。 常见产酶微生物 Common microorganism in Enzyme Production 1、细菌 细菌是在工业上有重要应用价值的原核微生物。在酶的生产中常用的细菌有大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等。 常见产酶微生物 Common microorganism in Enzyme Production 1、细菌 细菌属于真细菌纲(Schizomycetes