第四节核酶抗体酶同功酶酶工程ppt.ppt

第四节 核酶、抗体酶、 同工酶、酶工程 一、核酶（ ribozyme） 定义： 化学本质为RNA的酶。它具有识别和转化单链RNA的能力。 二、同工酶（isozyme） 三、 抗体酶(abzyme) （催化性抗体） 四、诱导酶（induced enzyme） 五、 酶工程 * 例：L19RNA 1982， Cech 等，研究四膜虫rRNA前体的成熟。 L19RNA —395个核苷酸构成的线状RNA分子 Fig.2-39 RNA splicing in Tetrahymena rRNA mutation. 内含子 外显子 鸟苷 Fig. 2-40 L19 is generated by the autocatalytic removal of 19 nucleotides from the 5’ end of the spliced intron. L19RNA 可催化寡聚核苷酸的切割和连接。 举例： 亚基 心肌型（H） 骨骼肌型 ( M) 含4个亚基 乳酸脱氢酶（LDH） 定义： 指能催化同一种化学反应，但酶分子的结构组成却有所不同的一组酶。 Fig. 2-41 The isozymes of lactate dehydrogenase. M4 M3H M2H2 HM3 H4 M4 M3H M2H2 HM3 H4 研究同功酶的理论及实践意义： （1）研究细胞分化及形态遗传的分子机理 （3）农业上用于优势杂交组合的预测 （4）以同功酶为临床诊断的指标 （2）研究同功酶对代谢的调控 用过渡态中间物的类似物作为半抗原（haptin）免疫动物产生的有催化活性的抗体。 能引起免疫反应的任何分子或病原体称为抗原。抗原可以是病毒、细菌、蛋白质或其他大分子。 半抗原（教材p272） 将不具免疫反应的小分子（如代谢中间物或产物）与载体蛋白质共价相连，这种形式的小分子可引起免疫反应。把这种本身无抗原性，与载体蛋白结合后有了抗原性的物质称为半抗原。 免疫球蛋白（抗体）的结构 重链（H） 轻链（L） 抗原结合部位 V：可变区 C：恒定区 Fc：基部片断 Fab: 臂片断（抗原结合片断） 铰链区 抗体酶本质上是抗体，但在可变区具有酶活性，所以称为抗体酶。 （a）半抗原-载体蛋白 （b）抗体酶催化的氨基转移反应 磷酸吡哆醛 羟酯 内酯 环状磷酸酯 环状过渡态 利用过渡态类似物环状磷酸酯为半抗原得到的抗体酶可使酯的水解反应增加1000倍。 抗体酶研究的意义： 理论方面： 为酶的过渡态理论提供有力的实验证据。 应用方面： ---设计针对特定化学反应的抗体酶。 ---设计专一破坏病毒蛋白质等的抗体酶。 ---抗体酶的固定化，制造生物传感器 结构酶 诱导酶 例：大肠杆菌?-半乳糖苷酶的诱导生成 天然存在的酶。 指当细胞加入特定诱导物后诱导产生的酶。诱导物一般是底物或其类似物。 细菌蛋白总量（?g） ?-半乳糖苷酶（ ?g ） 加入 诱导物 去掉 诱导物 Fig.3-28 ?-半乳糖苷酶的诱导生成 （一）酶在工业、农业、医药及科学研究中的巨大作用 工业：淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、凝乳酶等。 农业：淀粉酶、纤维素酶、果胶酶等 医药：血清GPT、GOT; 乳酸脱氢酶H4、 M4 消化剂、溶菌酶、木瓜蛋白酶、尿激酶 科研：限制性内切酶、DNA聚合酶、连接酶等 *