第十二章细胞分化与凋亡-细胞生物学在线.pptVIP

第十五章细胞衰老与凋亡;第一节　细胞衰老;一、人体细胞的动态分类;二、细胞衰老的特征（一）形态变化;（二）分子水平的变化;三、细胞衰老的分子机理;Thin rat bury fat rat;3．自由基学说（free radical theories）;自由基可引起DNA、蛋白质、脂类氧化、变性和交联，实验表明DNA中OH8dG随着年龄而增加。 正常细胞内存在清除自由基的防御系统。 酶系统：SOD、CAT、GSH-PX。 非酶系统：维生素E、醌类电子受体 Orr和Sohal（1994），将SOD基因导入果蝇，其寿命比野生型延长1/3。;4．程序性衰老（programmed senescence）;5．复制性衰老（replicative senescence）;6. 衰老基因学说;Werners syndrome;Hutchinson-Gilford syndrome;第二节 细胞坏死与凋亡;一、细胞死亡的方式;细胞坏死初期，胞质内线粒体和内质网肿胀、崩解，结构脂滴游离、空泡化，蛋白质颗粒增多，核发生固缩或断裂。 随坏死进程，细胞质呈强嗜酸性，苏木精/伊红染色呈均一红色。 细胞膜不完整，台盼蓝染色阳性(活细胞不着色)。 DNA随机降解，细胞内容物流出，引起炎症。 ;（二）细胞凋亡;;胸腺细胞;胸腺细胞;;（三）细胞程序性死亡;C. elegans是研究PCD的理想材料（生命周期短，细胞数量少）。 ;C. elegans雄虫有1031个体细胞、约1000个生殖细胞。 神经系统由302个细胞组成，来自于407个前体细胞，105个细胞发生了PCD。 控制线虫PCD的基因有：Ced-3、Ced-4和Ced-9。 Ced-3和 Ced-4诱发凋亡； Ced-9抑制Ced-3、Ced-4的作用。;2002年10月7日英国人Sydney 、美国人Horvitz和英国人Sulston ，因在PCD方面的研究获诺贝尔诺贝尔生理与医学奖。;二、细胞凋亡的生理和病理学意义;Sculpting the digits in the developing mouse paw by apoptosis（Wood 2000）;（二）病理学意义;三、细胞凋亡的检测方法;8. 常用检测细胞凋亡的染料： 二乙酸荧光素（FDA），绿色荧光，活细胞染色。 Hoechst 33342或33258，DAPI，吖啶橙（AO），半通透，凋亡和固定后的细胞荧光较强。 溴化乙啶（EB）、碘化丙啶（PI）、放线菌素D（7-AAD），不通透，正常和凋亡细胞拒染。 可用不同性质的染料对凋亡细胞进行双染色。;Human embryo at day 4 morula containing 23 nuclei labelled with DAPI (blue), including seven TUNEL-labelled condensed nuclei (pink, arrow) that were excluded from development (Kate Hardy 1999).;第三节 细胞凋亡的分子机理;一、凋亡相关的基因和蛋白;1．Caspase家族;Caspase classification（Zimmermann 2001）;2．Apaf-1;3. bcl-2基因家族;Bcl-2 gene family（Zimmermann 2001） ;4. Fas ;5．P53 基因组的守护者。辐射诱导的DNA损伤可通过ATM激活p53，阻断细胞周期，并提高Fas的表达，诱导凋亡。 6．Myc 转录因子，生长因子存在，Bcl-2基因表达时，促进细胞增殖，反之引起细胞凋亡。 7. ATM 是DNA损伤检验的重要蛋白激酶，能激活P53。;（二）Fas诱导的细胞凋亡;Caspase-8引起caspase级联反应，激活Caspase-3、6、7。 Caspase可降解结构蛋白、信号蛋白、转录调控蛋白、周期蛋白等等。 Caspase还可降解CAD（ caspase-activated Dnase ）的调节蛋白，释放出CAD，CAD进入细胞核，在核小体连接部位降解DNA。;在一型细胞（type I），如胸腺细胞中，caspase-8有足够的活性引起细胞凋亡，高表达Bcl-2不能抑制Fas凋亡途径。 在二型细胞（type II），如肝细胞中， Caspase- 8活性不足，必须通过线粒体途径放大死亡信号。 Caspase引起线粒体PT孔打开，跨膜电位下降； Cyt c被释放到胞质中、激活Caspase-9，后者再激活Caspase-3，引起级联反应。 ;Mitochondria function during cell apoptosis;Next topic is tumor cell.