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微生物的培养与应用课件2.ppt
;考点一 筛选菌株、统计菌落数目、设置对照;(2)实验室中筛选:
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括 、
、____等),同时 或 其他微生物生长。
(3)选择性培养基
在微生物学中,将允许 种类的微生物生长,同时抑制或阻止 微生物生长的培养基,称作 统计菌落数目
测定微生物数 量 的 常 用 方 法 有 法
和 法。;3.设置对照
(1)设置对照的主要目的是排除 中
对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。
(2)判断培养基中是否有杂菌污染:
。
(3)判断选择培养基是否具有筛选作用:
。;【知识拓展】;2.稀释涂布平板计数法
(1)原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活细菌。
(2)注意:统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,一般选择菌落数在30~300的平板进行记数,计算出平板菌落数的平均值。
(3)计算:按每克样品中的菌株数=(C÷V)×M(其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL,M代表稀释倍数)进行计算。
(4)结果分析:统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。因此,统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。可以通过设置重复组,增强实验的说服力与准确性。;【典例精析】;(1)本实验所需培养基为 ,碳源为 。
(2)实验原理是:
;(3)①→③重复培养的目的是
。
(4)⑤的菌落中大部分是降解 的微生物。
(5)⑥为 组,⑦为 组,设置⑥的目的是
。
(6)⑤→⑥采用 法,接种到⑥的培养基中,在操作过程中为防止污染应注意的事项是:
;考点二 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数;(2)做好标记
本实验使用的平板和试管比较多。为避免混淆,最好在 就做好 。例如,在标记培养皿时应注明 、 以及平板上培养样品的 等。
3.课题延伸
本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛 选。对分离纯 化 的 菌 种 作 进 一 步 的 鉴 定,还 需 要 借 助 的方法。在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的 将尿素分解成了 ,pH ,以 尿 素 为 唯 一 氮 源 的 培 养 基 加 入 ,如果pH升高, ,可以初步鉴定该种细菌能够分解尿素。;【知识拓展】;稀释方法:;(3)微生物的培养与观察、细菌的计数
①培养皿编号:104、105、106各编号三个培养皿。
②每个培养皿加入牛肉膏蛋白胨琼脂培养基15mL,冷却倒置。
③用移液管按照编号分别加入不同浓度土壤稀释液各0.1mL,转动培养皿,使土壤稀释液与培养基混合均匀。
④将培养皿放入30~37℃的恒温培养箱中培养。观察菌落数目并记录。
不同种类的微生物,往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌一般在30~37℃的温度下培养1~2天;放线菌一般在25~28℃的温度下培养5~7天;霉菌一般在25~28℃的温度下培养3~4天。每隔
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