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第二章 血液分析仪基本知识 第一节概述 血细胞分析常规检查是临床诊断工作中最常用的实验方法之— 其检测原理大致分为二部分：即电阻抗法与光散射法。 第二节 电阻抗法细胞检测原理 1.电阻抗法细胞检测原理 细胞计数电阻抗原理 1.电阻抗法细胞检测原理 在进行血细胞测定之前，全血标本必须用稀释液在仪器的外部或内部进行一定比例的稀释。 ２．电阻抗法白细胞分群 不同体积的白细胞通过小孔时产生的脉冲大小不同，而不同类型的白细胞（如淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞）经溶血剂作用后有明显的差异。 那么，仪器是如何进行细胞分群的呢？ 经过溶血剂处理后的白细胞根据体积大小可以初步确认其相应的种类：第一亚群（小细胞群）是淋巴细胞（ＬＹＭ），第二亚群是单个核细胞区（ＭＯＮＯ），也被称为中间细胞（ＭＩＤ）：相当于粒细胞的细胞群（GRAN）位于第三亚群（大细胞群）。 注意 由于各厂家血细胞分析仪使用的稀释液和溶血剂成分不完全相问，对白细胞膜的作用程度不同，所以仪器对各种类白细胞区分界限的规定有所不同，在使用时不应随意更换生产厂家试剂，防止造成错误的报告。 白细胞计数计算方法示意图 根据白细胞分类结果可以将电阻抗法血细胞分析仪分为两种：一类能报出淋巴细胞、单个核细胞和粒细胞三项百分比和绝对值，被称为三分群(tｈｒｅｅ-pａｒｔ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ)血细胞分析仪；另一类只能给出淋巴细胞和粒细胞两项百分比和绝对值，被称为两分群（Ｔｗｏ pａｒｔ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ）血细胞分析仪。为了保证白细胞分类结果的可靠性，两项分类结果很难正确地反映出病人的状况，难以用于白细胞分类的筛选。 三分群血细胞分析仪报警功能可以提高结果的准确性能，这类仪器可以用于对血常规检查标本白细胞分类的筛选。国内外有很多文章介绍三项分类准确性及临床应用，与人工显微镜白细胞分类计数结果相比，淋巴细胞和粒细胞有良好的相关性，相关系数大于0.９，警报提示系统也较可靠。认为此类仪器对综合性医院病人的分析结果准确可靠，可以作为人工分类的筛选手段。 3.电阻抗法红细胞检测原理： (1).红细胞数（RＢＣ）和红细胞比积: 迄今，绝大多数血细胞分析仪使用电阻抗法进行红细胞计数和红细胞比积测定，其原理同白细胞检测一样。红细胞通过小孔时，形成相应大小的脉冲，脉冲的多少即红细胞的数目，脉冲的高度代表单个脉冲细胞的体积。脉冲高度叠加，经换算即可得红细胞的比积 红细胞体积分布直方图 (2)．血红蛋白(HGＢ)含量测测 任何类型、档次的血细胞分析仪，血红蛋自测定原理都是相同的。被稀释的血液加入溶血剂后，红细胞溶解，释放血红蛋白，后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物，进入血红蛋白测试系统，在特定波长（一般在５３０～５５０ｎm）下比色，吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成正比，仪器使可显示其浓度 为了减少溶血剂的毒性，避兔含氰血红蛋白衍生物检测后的污物处理，近年来有些血细胞分析仪使用非氰化溶血剂（如 ＳＬＳ－Ｈｂ）。实验证明，形成的衍生物与ＨＩＣＮ吸收光谱相似，实验结果的精确性、准确性达到含有氰化物溶血剂同样水平。既保证了实验质量，又避免了试剂对分析人员的毒性和环境污染。 (３)．各项红细胞指数检测 红细胞平均体积（ＭＣＶ）、红细胞平均血红蛋白的含量（ＭＣＨ）、红细胞平均血红蛋白浓度（ＭＣＨＣ）、红细胞体积分布宽度（ＲＤＷ），均根据仪器检测的红细胞数、红细胞比积和血红蛋白含量实验数据，经仪器内存程序换算出来的。 计算公式 3．电阻抗法血小板检测原理 血小板随红细胞一起在一个系统中进行检测，根据不同的阈值，计算机分别给出血小板与红细胞数目 。 电阻抗法红细胞和血小板测试原理图 * *