第七章细菌和噬菌体的重组和连锁要点.ppt

第七章 细菌和噬菌体的重组和连锁 基本知识 细菌是单细胞，它的遗传物质是一个大型的环状核酸分子，称之为基因带，也可称为染色体。 若细菌丧失产生某种营养物质（如氨基酸）的能力就称为营养缺陷型，相对于缺陷型的野生菌株叫原养型。 病毒的结构是由蛋白质外壳和包裹在中间的一个单一的核酸分子（可称基因带或染色体）组成。 例如：细菌的基因组 One circular chromosome (4-5Mb) 原养型及营养缺陷型鉴别: 基因型的表示：用它们不能合成的物质的前三个字母? 7.1 细菌的遗传分析 细菌的杂交 以大肠杆菌为例，大肠杆菌K12中两个菌株A和B，菌株A是供体，含有F因子（F质粒），记作F+，菌株B是受体，没有F因子，记作F-。F因子又称性因子或致育因子，它是能独立增殖的环状DNA分子。 F+细菌的表面有称作性伞毛的细长纤毛。当F+细菌与F-细菌结合时，F因子通过性伞毛从F+细菌转移到F-细菌，原来的细菌还仍为F+。不过染色体很少通过结合而转移到F-细菌，所以染色体上的基因的重组频率很低。 细菌接合 杂交实验 Lederberg 和 Tatum 1946 回复突变or重组 ？？？ 细菌接合 杂交实验 Lederberg 和 Tatum 1946 A品系：met－ bio－ thi＋ leu＋ thr＋（thi：硫胺素B1） B品系：met＋ bio＋ thi－ leu－ thr－ A A+B B 基本培 养基 met ＋ bio ＋ thi＋ leu＋ thr＋出现频率:1/107 细菌接合（示：杂交实验） 达尔夫Davis U型管实验 细菌接合 遗传物质的单方向转移 Hayes实验 A: met- thr+ leu+ thi+ B: met+ thr- leu- thi- Donor： A Receptor：B 大剂量链霉素 A品系 无影响 大剂量链霉素 B品系 阻止了重组 F 因子（F 质粒） F 质粒与细菌接合 F因子特点 F＋细菌可以把F因子传给后代。 F＋细菌经吖啶橙处理F因子丢失，丢失后不再出现。 F＋可以和F－杂交，而不能和F＋杂交。 F＋和F－杂交后代皆为F＋，而且可以以10－7频率获得重组体后代。 Hfr菌株 因为F因子和细菌的DNA分子都是环状的，在环状的细菌染色体和环状的F因子间通过一个交换，环状F因子就整合到环状的细菌染色体上。 F因子整合到细菌染色体上的菌株就是高频重组菌株，称为Hfr菌株。高频重组菌株（Hfr菌株）跟菌株B（F-）杂交时，细菌染色体上基因的重组频率很高，即出现重组子的频率很高。 High frequence recombination（图示 F因子整合到细菌染色体的过程） Hfr与F-的接合（示：细菌的交换过程） Hfr品系与F＋菌株的区别 相同 1、都能和F－杂交。 2、杂交都要通过接合管和受体菌相联接。 3、高剂量链霉素处理后都不影响杂交，说明它们都是作为一种供体。 不同 1、产生重组子频率不同，Hfr×F－为10－4，F＋×F－为10－7。 2、 F＋×F－后代F＋， Hfr×F－后代F－。 3、 F＋细菌经吖啶橙处理变成F－，Hfr经吖啶橙处理仍为Hfr。 中断杂交技术：把Hfr细菌与F-细菌混合培养，每隔一定时间取样，将试样搅拌并稀释后在选择培养基上培养，使其只有重组子类型可以生长，分析Hfr染色体上基因进入受体细胞（F-细菌）的顺序各所需时间（分钟），这种根据供体基因进入受体细胞的顺序和时间绘制连锁图的技术，称为中断杂交技术。 中断杂交实验 巴斯德实验室，Elie Wolliman和Francois Jacob （1）.Wollman和Jacob的实