山苦茶对运动小鼠的肝糖原和丙二醛的影响.docVIP

山苦茶对运动小鼠的肝糖原和丙二醛的影响 　　【摘 要】为探讨山苦茶提取物对运动小鼠肝糖原和醛二酮的影响。方法 小鼠随机分为运动对照组和组。虫草组每天虫草混悬液灌胃， 对照组给予等量生理盐水。将30只SD 小鼠随机分为对照组和服药组，通过游泳训练6周后，测定力竭后对照组和服药组小鼠的肝糖原（LG）、肌糖原（MG）肝（肌）糖原和丙二醛（MDA）的生化指标。 结果表明：山苦茶组肝糖原（肌）含量显著高于对照组（P0.05）；而丙二醛比对照组含量降低明显（ P0.05） 。结论：说明山苦茶具有显著的抗疲劳效果， 能够提高小鼠的运动能力。 　　【关键词】山苦茶；丙二醛；肝糖原；肌糖原；小鼠 　　【中图分类号】R587.1 【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）06-3468-01 　　山苦茶俗称为鹧鸪茶，系大戟科野生桐属，其主要分布在中国的海南岛、及雷州半岛一带。有研究报道，其含有丰富的多种矿物质、氨基酸等，具有清热解毒、利胆消食等功效，人们习惯把叶子晒干后泡制成茶，具有浓郁的海南地方特色和民族特色[1]。慢性疲劳已成为困扰人们的正常生活、工作，关于茶叶抗疲劳的已有报道表明绿茶、和普洱茶和乌龙茶等等，具有较好的抗疲劳作用[2]；本文以山苦茶作为原料，通过对运动小鼠的各项生化指标检测，探讨山苦茶对其作用效果。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物 雄性昆明种小鼠， 体重25～ 30g， 由中山大学实验动物中心提供。按实验组分笼饲养， 同时购买基础饲料，自由进食和饮水，经过1周适应期后进行实验。 　　1.2 实验材料 材料为海南野生类型山苦茶， 由海南省当地农民提供。山苦茶提取物的制备将天然植物海南野生山苦茶加水浸泡1小时，煮沸2 次 每次1 h， 过滤，合并滤液，乙醇沉淀，静置48 h，回收滤液中的乙醇，浓缩滤液，使得每毫升滤液含生药0.10 g[2]。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 绞股蓝提取物的制备将天然植物海南野生绞股蓝加水浸泡1 h， 煮沸2 次， 每次1 h， 过滤，合并滤液，乙醇沉淀，静置48 h，回收滤液中的乙醇，浓缩滤液，使得每毫升滤液含生药0.10 g[3] 　　1.3.2 动物的给药和分组 将实验小白鼠随机分成2组：运动训练对照组、运动训练山苦茶预处理组， 并按每笼15只分笼饲养。给药组采用灌胃法给药， 按生药1.5 g/kg.d 的剂量进行灌胃（根据实验动物学和中药药理学， 按照60kg 成人用量9.3 倍进行计算）， 对照组灌胃相应剂量的生理盐水作为安慰剂。每天1次，连续6周。 　　1.3.3 训练方案训练组采用递增负荷式进行4周的游泳训练，每周游6 d，水温（31±1）℃，水深35cm。第1周每天游泳30 min，以后每周递加10min，至第6周游泳每天80min，第6周训练结束后处死，在处死前称重， 称重后进行最后1 次力竭性游泳， 记录游泳时间。力竭判断的标准为：当小鼠游至连续3 次没入水底，每次超过10 s，且放在平面上无法完成翻正反射视为力竭疲劳[4]。力竭运动后即刻处死。采用断头法采取血样后，用离心机以3 000 r/min 速度离心10 min，分离血清，检测 MDA. 然后立即取出肝脏和骨骼肌组织，置于冰生理盐水中洗净血液，检测LG和MG。 　　1.3 测试指标 　　根据实验研究的需要， 选择肝糖原（LG）、肌糖原（MG）肝（肌）糖原和丙二醛（MDA）的生化指标等作为测试指标，实验组和对照组进行对比测试.。 　　1.3.1 肌（ 肝） 糖原的测定 蒽酮比色法： 取出肝脏和骨骼肌组织， 用0.9%NaCl 溶液冲洗后， 再用滤纸吸干， 准确称取100g ， 放入盛有3mL30% KOH 的试管中， 置沸水浴30min， 取出冷却后， 将其转移至50mL 容量瓶中， 用水多次洗涤试管， 一并收入容量瓶， 加水至刻度， 摇匀待用。向样品管中加入1.0mL 去离子水， 空白管中加入2.0mL 去离子水， 标准管中加入2.0mL 标准葡萄糖液， 再向各试管中加入4.0mL 蒽酮比色液（ 当日配制） ， 摇匀， 置沸水浴10min， 冷却后在620nm 波长处测吸光值（ A） ， 空白管调零。 　　肌糖原含量（ g/100g 肌肉） = （ A 样品管/A 标准管?标准葡萄糖含量（mg）/1000?稀释倍数?100?0.9 　　上式中， 标准葡萄糖含量为0.10mg ； 稀释倍数为100； 0.9 为此法测得的葡萄糖含量换算成糖原含量的系数。 　　1.3.2 血丙二醛含量的测定： 采用硫代巴比妥酸法。分离血清， 按照试剂盒说明操作， 测定血丙二醛含量。 　　1.4 统计学分析 　　用SPSS12.0 统计软件对所测数据进行处理， 所有