思密达延迟给药对百草枯中毒大鼠血浆百草枯浓度的影响.docVIP

思密达延迟给药对百草枯中毒大鼠血浆百草枯浓度的影响 　　[摘要] 目的 观察延迟思密达（Smecta）给药对百草枯（Paraquat，PQ）中毒大鼠血浆百草枯浓度、影响，分析其作用机理。方法 SPF级SD大鼠76只随机分为生理盐水对照组（A组）6只、30 min百草枯灌胃染毒对照组（B组，30只）、30 min思密达灌胃干预组（C组，30只）。B组、C组中毒后2、6、24、48、72 h分批处死存活的大鼠，每次6只，测定血浆PQ浓度。结果 各组大鼠无自然死亡，染毒大鼠血浆百草枯浓度随时间延长而迅速下降，B组PQ血浆浓度（ng/ml）范围（4 269.237 6±356.757 7，456.556 0±78.062 5）；C组与B组在同一时间点相比，中毒后2、6 h血浆浓度明显降低（P0.05），其他时间点差异无统计学意义。结论 中毒后30 min思密达灌胃能在一定程度上降低大鼠血浆百草枯浓度。 　　[关键词] 思密达；百草枯；血浆浓度；病理变化；治疗作用 　　[中图分类号] R459.7 [文献标识码]A [文章编号]1674-0742（2014）03（c）-0039-02 　　PQ对人毒性极强且中毒事件频发，在亚洲国家尤为严重。研究报道，人口服PQ致死量为1～3 g（20%PQ溶液5～15 ml或者30 mg/kg[1]。虽然国内外学者一直致力于PQ的基础和临床研究[2]，但仍未探索到效的治疗方法，死亡率居高不下。临床研究证实血浆百草枯浓度是决定患者预后最重要的因素之一，及时清除、阻断口服百草枯由胃进入小肠，防止百草枯经血液循环到达重要脏器，是目前提高患者生存率的关键。思密达具有显著的胃肠道保护作用，在临床得到广泛的应用[3]，报道显示其对酒精、有机农药中毒有着独特的疗效，但目前仍少见思密达对百草枯中毒患者血浆浓度影响的研究。我们课题组前期研究发现在百草枯中毒后10 min给予大鼠思密达灌胃，干预组大鼠的血浆浓度比染毒对照组明显改善，基于此，我们继续在大鼠百草枯中毒后30 min延迟给予思密达灌胃进行干预，进一步观察思密达对百草枯中毒大鼠血浆浓度的影响，为治疗百草枯中毒探索有效途径。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物、试剂及仪器 　　SPF级成年SD大鼠76只，购自新疆乌鲁木齐市疾病防治和控制中心动物科，批号 SCXK（新）2003-0002，重量200-250 g；20%百草枯水剂（江苏南通先正达农药公司） ；PQ标准品（HPLC）99.9area%，100mg，美国SIGMA-ALDRICH ）；乙腈（色谱纯）、甲醇（色谱纯）、三乙胺（分析纯）、磷酸（分析纯）均购自天津光复试剂有限公司；庚烷磺酸钠，分析纯，purity≥98%，20g （加拿大BBI），编号S2068，上海生工生物工程公司提供；思密达（博福-益普生天津制药有限公司生产）；HC-C18色谱柱（250×4.6×5 mm，美国，Agilent）；日本岛津高效液相色谱仪（编LC-20AT泵；CBM-20A控制器；SPD-M20A检测器；SIL-20A自动进样器；CTO-10AS VP 柱温箱；CLASS-LC10工作站） 　　1.2 方法 　　1.2.1 动物分组、标本采集 实验参照文献[4]进行。大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组（A组）6只、30 min染毒组对照组（B组）30只、30 min思密达干预组（C组）30只。B、C组给予PQ（50 mg/kg）稀释至l ml灌胃染毒，A组同时给予l ml生理盐水灌胃。C组染毒后30 min给予思密达400 mg/kg（浓度60 mg/ml）灌胃，A组和B组同时等量生理盐水灌胃。B组、C组分别于中毒后2、6、24、48、72 h处理存活的大鼠，每次6只。氯胺酮注射液150 mg/kg 腹腔注射麻醉，下腔静脉取血3 ml，5 000 rpm离心5 min取血浆，-70 ℃冻存待测[5-6]，A组于实验结束后按同样方法一并处理。 　　1.2.2 血浆百革枯含量检测 精确称取百草枯标准品10 mg于l0 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，得浓度为1.0 mg/ml浓标液。浓标液储存于4 ℃冰箱中，工作液在使用前由浓标液逐级稀释制得。仪器分析条件：Agilent （HC-C18，250×4.6×5 mm）色谱柱；流动相： 乙腈：75 mmol/L庚烷磺酸钠（12：88，V/V，用三乙胺调PH=3.0）；流速为1.0 ml/min；柱温为室温；检测波长为258 nm。吸取血浆上清液0.5 ml置于试管中，加入体积分数为35%的高氯酸100 ml，蜗旋1 min。高速离心12 000 rpm5 min，取上清液20 ml迸样进行HPLC分析，记录实验数据。精确配制百草枯浓度为2