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PG酶
提 要 概述了植物多聚半乳糖醛酸酶(PG)的作用方式、组织定位、序列结构及其功能等。对PG同工酶、序列差异性及功能多样性进行了讨论。 关键词 植物;多聚半乳糖醛酸酶;功能;综述Structure and Function of Plant Polygalacturonases-A ReviewLu Shengmin,Xi Yufang,Jin Yongfeng,and Zhang Yaozhou(Biochemistry Institute,Food Science and Technology Departme nt,Zhejiang University,Hangzhou 310029) Abstract The action mode,localization,sequence structure and function of plant polygalac-turonases were summarized,and their iso-enzymes,sequence difference and function multiformity were also discussed. Key words Plant;Polygalacturonase;Function;Review 果胶是植物细胞壁的主要成分之一,与半纤维素一起组成共同伸展的网络状结构,纤维素微 纤丝镶嵌在其中,这是Carpita等提出的植物初生壁模型〔1〕。果胶类分子的主要特 征是由α-(1→4) 连接的D-半乳糖醛酸线状链,其中有些半乳糖醛酸的羧基发生 了甲基酯化,有的在线状主链上插入了一些鼠李糖单位,这些鼠李糖残基上常带有富含阿拉 伯聚糖和半乳糖的侧链。果胶结构通过二价阳离子交联及与其它细胞壁聚体共价结合而加强 。植物细胞分化和形状巨变时,果胶网络结构发生系统性的分解,因此,果胶代谢在植物发 育过程中具有重要的作用。 许多酶与催化果胶降解有关。外切和内切多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶裂解酶、果胶甲基 酯酶和β-半乳糖苷酶通过作用于中性支链残基而使果胶聚合体的分子量降低〔2〕。 此外,还有可能存在至今未发现的酶在裂解果胶与细胞壁其它结构网络间的共价键上起作用 。人们对PG调节果胶降解已有广泛研究,本文综述植物PG的结构与功能研究进展。1 PG的作用方式和组织定位 早在1965年,Hobson〔3〕用细胞壁蛋白粗提液体外降解纯化果胶的方法发现了果实 软化与PG活性的相关性,并将PG按作用方式分为内切多聚半乳糖醛酸酶(endo-PG)、外切 多聚半乳糖醛酸酶(exo-PG)和寡聚半乳糖醛酸酶(oligo-PG)。前者以内切方式水解断 裂多聚半乳糖醛酸链,后二者以外切方式依次从半乳糖醛酸多聚链或寡聚链的非还原端释放 出一个单体或一个二聚体。endo-PG对底物的特异性较强,exo-PG则较弱。 Tieman〔4〕应用免疫定位法检测整个番茄果实中的PG蛋白,发现PG的积累首先出现 于心皮到果实中柱的这部分组织中,其次出现于果皮组织和其辐射状细胞的细胞壁中,在时 间上PG的积累和茄红素的积累同步,PG蛋白大多存在于细胞壁间层或初生壁,少量定位于细 胞质膜上。Pear用趋于成熟的番茄果皮为材料,应用PG-cDNA探针进行分子杂交,发现PGmRNA在果皮外层细胞和维管区细胞内含量较高〔5〕。 另外,PG也在果实、叶和花脱落区,豆荚、花药、花粉粒、花粉管及快速生长组织中被检出 ,表明PG参与植物发育的许多过程。2 PG同工酶 Tucker等〔6〕研究番茄PG时发现共有2种同工酶,分别是PG1和PG2。PG1分子量较大 ,等电点为 8.6,热稳定性较好,出现于果实成熟的早期阶段。Brady等 〔7〕又发现,随着果实的成熟出现2种分子量较小的同工酶,即PG2A和PG2B,分子量分别 为42kD和46kD,其等电点均为 9.4。以后的研究证实PG2A 和PG2B是同一基因的产物,其差异只在于糖苷化的程度不同〔8〕。这3种同工酶均为 糖蛋白。PG蛋白的SDS变性及蛋白酶消化反应〔6〕,免疫交叉反应〔9〕表明 了PG1是PG2A或PG2B与其它亚单位的非共价复合体。Giovannoni等证明了这2种同工酶在DNA 水平上源自于同一PG基因组〔10〕。Pressey纯化出了这种能将纯化的PG2A和PG2B转 换成PG1的因子,将其命名为PG转化子〔11〕,这是一个约为100kD的糖蛋白 ,对蛋白酶敏感,但具有很高的热稳定性。由于PG转化子能在未成熟组织中被检出和某些抽 提条件下只能得到PG2同工酶,所以Pressey〔12〕认为PG1只是抽提过程中所得的假 象,并不一定存在于果实中。Knegt等〔13〕发现纯化的PG转
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