DPPH法研究北沙参茎叶乙醇提取物的体外抗氧化活性.docVIP

DPPH法研究北沙参茎叶乙醇提取物的体外抗氧化活性 　　摘 要：本实验用DPPH 法研究北沙参茎叶乙醇提取物的体外抗氧化活性，测定不同浓度北沙参茎叶乙醇提取物对DPPH·自由基的清除能力。结果表明：北沙参茎叶乙醇提取物具有一定的清除DPPH·自由基能力，但抗氧化活性弱于抗坏血酸，仍显示出较好的抗氧化活性，是一种安全性较高的新型天然抗氧化物质。 　　关键词：北沙参茎叶；DPPH 法；抗氧化活性 　　北沙参（Radix Glehnic）又称莱阳沙参、辽沙参等[1]，为伞形科植物珊瑚菜Glehnia littoralis Fr. Schmidt ex Miq.的干燥根。北沙参茎叶为其上部组织，它含有较丰富多糖类等物质[2]；北沙参茎叶不同提取物具有增强小鼠免疫功能的作用[3-4]；但目前对北沙参茎叶抗氧化活性的研究尚未见报道。现代研究结果表明，自由基[5]作为致病因子与肿瘤、衰老、心血管疾病和帕金森综合症等的发生有关[6]。因此，在天然植物中寻找高效低毒的抗氧化物质成为当前研究的热点。山东莱阳为北沙参道地产地，但北沙参在采收过程中其茎叶往往被遗弃。为有效利用自然资源，本文选取莱阳产北沙参茎叶作为研究对象，采用DPPH 法研究其体外抗氧化活性，为北沙参茎叶在保健、功能食品及药品方面的开发利用提供参考。 　　1材料与方法 　　1.1材料与仪器 　　1.1.1材料 北沙参于2012年10月初采自山东省莱阳市高格庄镇胡城村，经山东中医药高等专科学校中药系张钦德教授鉴定为北沙参正品。将刨出的北沙参收集其茎叶，自来水洗净阴干后，置干燥箱中50℃烘干，取出粉碎，过40目筛备用。 　　1.1.2试剂 二苯代苦味酰基自由基 （DPPH·，Sigma化学有限公司）；抗坏血酸（Vc）、95%乙醇等均为分析纯。 　　1.1.3仪器 KQ3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），超声波功率为150W；TU-1901型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；DHG-9140A型电热鼓风干燥箱（上海鹏顺科学仪器有限公司）；RE-2000A型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；SHZ-Ⅲ型循环水式真空泵（上海亚荣生化仪器厂）；XP205DR电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；TG20-WS台式高速离心机（长沙湘智离心机仪器有限公司）。 　　1.2实验方法 　　1.2.1北沙参茎叶乙醇提取物制备 　　称取北沙参茎叶粉末2.000g，按l：30的料液比加入体积分数为70%的乙醇，浸泡12h后，70℃的温度下超声提取两次，每次40min；抽滤，合并滤液，滤液经旋转蒸发器浓缩，用70%乙醇定容至100mL棕色量瓶中。所得醇提取液为供试液，含原药材量相当20 mg/mL。 　　1.2.2抗氧化活性测定实验 　　评价天然植物提取物体外抗氧化活性的方法有许多种[7-8]，DPPH法是其中的一种，该法具有快速、简便的优点，是目前应用最广泛的定量测定天然植物提取物体外抗氧化活性评价方法[9]。 　　北沙参茎叶乙醇提取物清除DPPH·自由基能力的测定[10] 精密称取一定量的DPPH·，用95%乙醇配制成1×10-4mol/L的DPPH溶液定容于棕色量瓶。分别准确移取2mL不同浓度（0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，2.0mg/mL）的供试液于10mL比色管中，加入1×10-4mol/L的DPPH·溶液2mL，混匀，室温避光放置30min，10000r/min离心6min，取上清液用分光光度计在517nm处测吸光度Ai；同时测定2mL北沙参茎叶醇提取液与2mL95%乙醇混合后的吸光度Aj，以及2mLDPPH溶液与2mL95%乙醇混合后的吸光度Ac，平行测定3 次，取平均值。以Vc作阳性对照。用以下公式计算其对DPPH·自由基的清除率。 　　2 结果与分析 　　2.1北沙参茎叶乙醇提取物对DPPH·自由基清除作用 　　3 结论 　　北沙参茎叶乙醇提取物抗氧化活性的实验结果表明，其对DPPH·自由基具有明显的清除作用，且清除能力随北沙参茎叶乙醇提取物浓度的增大而增强。北沙参茎叶乙醇提取物清除DPPH·自由基的能力较对照抗坏血酸弱，在样品浓度为2mg/mL时，其抗氧化性是VC的90.5%，仍具有明显的抗氧化活性，是一种安全性较高的新型天然抗氧化物质，具较好的开发利用价值。 　　参考文献 　　[1] 蔡永敏.中药药品辞典[ M ] .北京：中国中医药出版社，1996：97. 　　[2] 吕方军，叶国华，许一平等.北沙参茎叶多糖的含量测定[J]. 中药新药与临床药理，2012，23（1）：84-86 　　[3] 吕方军，叶国华，许一平等. 北沙参茎叶提取液对免疫抑制小鼠免疫功能的影响[J].时珍国医国药，2012，23（4