血清蛋白质量的测定.pptVIP

实验目的 血清总蛋白 蛋白质含量测定的几种方法 凯氏定氮法（图） 凯氏定氮法 紫外吸光光分度计 Folin－酚试剂 考马斯亮蓝 实验原理 相似的 注意！ 实验试剂 WHY ? 实验操作 计算公式 临床意义 注意事项 * No.3 血清总蛋白含量的测定 by:煜.明.奇.婷.远 1 1. 熟悉血清总蛋白的测定方法（双缩脲法） 2. 掌握血清总蛋白测定的临床意义 2 血清蛋白 球蛋白 白蛋白 35~50g/L 20~40g/L 3 用于层析柱流出液的检测；核酸的吸收可以校正 蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基在280nm处的光吸收 快速 5～10分钟 较为灵敏 紫外吸收法 用于快速测定，但不太灵敏；不同蛋白质显色相似 多肽键＋碱性Cu2＋?紫色络合物 中速 20~30分钟 灵敏度低 双缩脲法（Biuret法） 用于标准蛋白质含量的准确测定；干扰少；费时太长 将蛋白氮转化为氨，用酸吸收后滴定 费时 8～10小时 灵敏度低 凯氏定氮法 （Kjedahl法） 说明 原理 时间 灵敏度 方法 4 最好的方法； 干扰物质少； 颜色稳定； 颜色深浅随不同蛋白质变化 考马斯亮蓝染料与蛋白质结合时，其?max由465nm变为595nm 快速 5～15分钟 灵敏度最高 1～5?g 考马斯亮蓝法(Bradford法) 耗费时间长；操作要严格计时； 颜色深浅随不同蛋白质变化 双缩脲