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(3)环境数据的采集:在现场调查的同时,对调查点的经纬度、农田农作物、荒地、林地的植被类型、林地的类型(针叶、阔叶、混交林)和地形进行描述性记录 (4)标本保存方法 (5)预算 蜱的调查方法 2.采集准备 (1)采集工具 白布旗(90cm×60cm) 鼠夹、鼠笼、鼠布袋(30cm*20cm)、冻存管袋(20cm*4-5cm) 解剖器材:眼科剪、眼科镊(直头、弯头)、止血钳等 记录笔,记录表格,记号笔,梳子,毛笔等 注射器 (2)防护用品: 防蚤袜 防护服 乳胶手套 驱避剂 疫苗 (3)标本保存用品 采血管、15ml离心管、50ml离心管、1.5ml冻存管、冻存管盒、1.5ml离心管、冻存管袋、 200ul tip、液氮罐 蜱的调查方法 3.采集方法 (1)布旗法调查野外游离蜱:用100cm×100cm的白棉布旗,窄的一边两端用绳子固定,将旗子平铺地面,拖拉绳子前进,每步行10m即可停下检视附着的蜱数,根据调查地段内植被情况选择不同的方法进行定时或定距离拖蜱。如是较平整的草地,可拖拉布旗在草地上行走;如是灌木丛则手持木杆在灌木丛和杂草上来回挥动布旗。将附着在布旗上和拖蜱者身上的蜱用镊子捡起装入管内,立即旋紧管盖或塞紧塞子。每一样地的蜱放入同一管内或做一致编号,带回实验室进行相关的分类鉴定、计数和检测。 如需调查密度,可在选择的样地均匀的拖或挥旗,以每人每小时或每人每100m所捕获蜱数进行密度指数统计(单位分别为只/布旗人工小时和只/布旗100米)。一般每一样地拖旗或挥旗不能低于30min或不少于500m。 如需调查季节消长规律,可固定线路采用布旗人工小时法,在每次捡蜱计数后将蜱再撒回拖蜱区段,并做好地段标记,5-10天后在标记的各地段内再次进行调查,比较密度变化。 (2)宿主动物体表检拾蜱类:在布旗法难以奏效的地点或蜱类吸血期内或特定调查目的可采用此方法。每只动物体表的蜱放入同一管内或做一致编号,带回实验室进行相关的分类鉴定、计数和检测。如需调查密度,可计算每只动物捡到的蜱数,称带蜱指数,单位:只/动物体。 I. 调查样地周围牛、羊、狗、鸡等家畜和家禽: 重点检查动物的耳朵、眼睛周围、口鼻周围、脖子、腋窝、胸脯、乳房、大腿根、阴囊、肛周、会阴、尾根等部位,毛较长的动物需用手触摸,发现蜱时,正在吸血的蜱类假头容易折断,应用小镊子夹紧假头先轻轻拉拽和左右晃动,使之能上下摇动,然后再果断拔除,必要时可连带部分动物皮毛。动物可适当固定。 II. 调查野生小型哺乳动物: 在不同的地形(山区(阴坡/阳坡)、半山区、丘陵、平原、盆地等)、景观植被(村庄、农田、灌丛、草原、林地(针叶林、阔叶林、针阔混交林/次生林、原始森林等))选择具有代表性的样地作为调查点,每夜布放200只鼠笼(每隔5米放置一个鼠笼,室内每房间1笼,15平方米的房间布2笼)(鼠笼布放不便可布放200只鼠夹)。每天清早捡收捕获动物体表的蜱类、连续3天。处理方法具体如下:将所捕鼠置于密闭容器内(带盖塑料桶),用乙醚深度麻醉(如需采血,注意不要麻醉过度,使动物死亡,但也要注意麻醉太浅,其体表寄生虫未被麻醉),无菌采血、取脏器,然后置于白瓷盘中,用镊子夹取盘中和鼠体表的寄生物,例如蜱、螨、蚤等,每只鼠的寄生物分开放置于盛有75%酒精的密闭容器中,与鼠对应标号。重点检查动物毛根部、口鼻部、耳朵、眼睛、外耳、足趾等部位及其周围,并翻查收鼠时的鼠布袋表面。 每只鼠的血、脏器、媒介标本的编号应一一对应。 III. 调查野生动物专售摊位: 清早检查新近捕获的野生动物如野兔、野鸡、麂子等动物及新剥兽皮上携带的蜱类,检查时可将动物或兽皮各自分开,盛于容器内,以免因动物死亡已从体表脱落的“游离”蜱在不同的动物间流动、爬走或爬上人体。检查方法同家畜。 (3)调查室内游离蜱: 调查畜舍、圈栏、狗房、鸡窝等,检查场所表面尤其是墙角,不易进入的巢穴,可利用能够吸引或黏附的长柄工具如勺匙、绒布探棒等进行调查,狗舍、鸡舍等如是土坯或砖可翻砖找蜱。 (4)野生动物巢穴游离蜱: 调查野生动物洞巢内容物或洞窟底层浅土,发现蜱时,用镊子将蜱轻轻夹出;不易进入的洞穴,可利用能够吸引或黏附的长柄工具如勺匙、绒布探棒等进行调查,计算密度时一般每洞探棒3次;调查鸟窝时,可选择成鸟离窝时用塑料袋套住鸟窝,将鸟窝整体迅速从附着处取下,绑好塑料袋,以免跳蚤等寄生虫跳出,放入带盖的桶内用乙醚麻醉约5-10min,然后揭开盖等乙醚散净后捡拾寄生虫,做好记录。 上述所有方法采集的标本,均要记录采集地点、生境、宿主、时间、采集者、采集方法等信息。 4.标本保存 1)用于形态分类的死蜱标本保存:将捕获的蜱类用70-80℃的热水杀死,取出后稍干,泡在65%-75%乙醇中,乙醇容量要比标本多4-5倍。 2)活蜱标本的保存:一些吸血尤其是饱
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