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临床生化综合性实验摘要:本综合性实验结合理论课“肝胆疾病的生物化学诊断”章节内容,由学生查阅文献,选择一种急性肝损伤实验模型建立方法,进行实验设计,选择检测指标,确定实验方法,进行课题实施、质量控制、实验数据汇总、撰写论文。本综合性实验的开设和实施既能激发学生对疾病的思考,更好地理解肝胆功能异常和代谢紊乱所致疾病的发病机制,又有助于提高大学生的实验操作技能、创新能力和基本的科研素质,为以后的临床和科研实践打下基础。关键词:临床生物化学与检验;肝功能;综合性实验;急性肝损伤中图分类号:G642.0;R2 文献标志码:A 文章编号:1674-9324(2016)09-0240-02临床生物化学与检验(clinical biochemistry and biochemical test)是用化学和生物化学技术检测人体标本,了解人体生理、病理状态下物质组成和代谢,为临床疾病的预防、诊断、治疗和预后提供依据的学科,其核心是向临床提供准确、有效、及时的检验报告[1]。它是生物化学的重要组成部分,是医学检验专业的主干专业课程,同时也是临床医学专业学生《实验诊断学》课程的重要内容。肝胆疾病的生物化学诊断是医学检验专业《临床生物化学与检验》的主要内容。肝脏是人体内最大的、功能最多的实质性腺体器官,被喻为人体最大的化工厂。它参与体内消化、代谢、排泄、解毒和免疫等过程,是具有重要而复杂代谢功能的器官。为检查肝脏功能完整性、有无疾病和损伤,从不同角度设计了许多检查肝脏的实验项目,临床上常将肝脏实验室检查统称为肝功能检查。肝功能实验检查的目的是通过某些生物化学指标检测,间接评估肝脏功能,为临床医生正确地做出肝胆疾病诊断、病程检测及疗效观察等提供重要参考信息,可选择的肝功能指标很多,了解每项检查的临床价值,对评价肝脏功能非常重要。急性肝损伤(acute liver injury)一般由短期接触较大剂量肝毒物或肝脏功能不全时接触某种肝毒物引起,病理改变常见于肝细胞坏死、脂肪变性、胆汁淤积等。多种因素如化学性肝毒物、病毒感染、免疫性因素、乙醇等均可引起急性肝损伤,甚至肝功能衰竭,其防治研究一直是热门课题[2-5]。本次综合性实验主要在医学检验专业本科学生中开设,其主要内容通过建立急性肝损伤模型,选择2~3个反映肝细胞损伤状况的指标进行检测。一、实验目的主要包括熟悉文献查阅方法、实验设计和综合报告的撰写格式;熟悉生物材料样品采集和取样原则及一般要求;掌握肝功能检验项目的选择原则、肝胆疾病的临床酶学分类、转氨酶分类及其检测意义;掌握ALT、AST主要测定方法原理、操作步骤、注意事项;初步掌握检测数据统计与分析方法。二、实验课程基本流程(一)实验设计本阶段主要充分利用网络资源,使学生熟悉文献查阅方法。通过查阅文献资料,首先了解目前国内外研究中常用的急性肝损伤模型,选择一种化学物质建立急性肝损伤模型,确定染毒剂量、方式、生物标本的采集时间;确定实验动物、性别、年龄及组别;列出所需试剂与器材清单;样品预处理方法;检测指标、检测方法的选择;实验结果的统计与处理以及论文撰写。最终以论文开题的形式在班级展示,并由专业课老师给予点评和指导,提交一份开题报告。(二)课题实施此部分为本次综合性实验的主体部分,包括动物的选择、染毒、生物样品的采集、预处理、分析检测、数据的统计分析、论文撰写等。在这个阶段,要求学生需要熟悉或掌握的知识点较多。比如:理论部分要求掌握:(1)肝功能检验项目的选择原则;(2)肝胆疾病的临床酶学分类;(3)转氨酶分类及其检测意义;(4)ALT、AST主要测定方法;(5)连续监测法及赖氏法测定ALT、AST的原理、注意事项。操作部分:(1)试剂的称量与配制;(2)实验动物的抓取方法、编号标记、分组原则;(3)实验动物的染毒技术、生物样品的采集、预处理;(4)赖氏法测定ALT、AST的操作步骤;(5)数据的处理、统计分析以及论文撰写等。(三)数据分析和撰写报告一个完整的临床生物化学检验过程,包括样品采集、样品预处理、分析测定、数据处理和撰写报告五个步骤。在此过程中,每个步骤均可能产生实验误差,如所选取的样品是否具有代表性、样品预处理方法选择是否合适、分析方法及仪器和器皿、化学试剂和实验用水等,还包括检验人员的技术水平和实验环境。为了保证实验室提供的分析数据准确可靠,首先必须对上述各方面实施严格的质量管理措施,尽量减小和避免实验误差;其次要求同学们掌握生化检测数据(特别是组间数据)的表示方式;在统计分析时,要求掌握两组或多组间数据的比较方法,正确应用三线表;最后,熟悉科研论文的书写格式,以小论文的形式把此次综合性实验的结果展示出来。三、考核方式本实验采取分组教学,为最大限度调动同学们的积极性及团队协作精神,保证每一位同学都能动手操作,安排2~3人一个小组,各组可选
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