【高考必备】生物一轮教学案：专题26考点二　微生物的应用Word版含解析[精品原创].docVIP

基础点 1　微生物的实验室培养 (1)培养基 ①概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 ②成分 ③分类 (2)无菌技术 ①含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 ②关键：防止外来杂菌的入侵。 注意点　消毒和灭菌的辨析 项目 条件 结果 常用方法 应用范围 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 日常用品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 灼烧灭菌法 接种工具 干热灭菌法 玻璃器皿、金属工具 高压蒸汽灭菌法 培养基及容器的灭菌 (3)纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 ①制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 ②纯化大肠杆菌 a．原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 b．方法：平板划线法、稀释涂布平板法。 ③菌种的保藏 a．短期保存：固体斜面培养基上4 ℃保存，菌种易被污染或产生变异。 b．长期保存：甘油瓶中－20 ℃在冷冻箱中保藏。 　2　土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 (1)菌种筛选：使用尿素是唯一氮源的选择培养基培养。 (2)统计菌落数目：常用方法有稀释涂布平板法、显微镜直接计数法。 (3)细菌分离与计数的实验流程：土壤取样→配制培养基→微生物的培养与观察→细菌的计数。 　3　分解纤维素的微生物的分离 (1)纤维素酶 ①组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。 ②作用 (2)菌种筛选 ①方法：刚果红染色法。 ②原理 →红色复合物红色消失、出现透明圈 即：使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 (3)筛选流程 土壤取样：富含纤维素的环境 　↓ 选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量 　↓ 梯度稀释 　↓ 涂布平板：将样品涂布于含CR的鉴别纤维素分解菌的培养基上 　↓ 挑选产生透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈 重难点　 1　选择培养基和鉴别培养基的应用实例 类型 实例 选择 培养基 培养基中加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 培养基中加入高浓度的食盐用于分离得到金黄色葡萄球菌 以尿素作为唯一氮源的培养基用于分离分解尿素的细菌 不添加氮源的培养基用于分离固氮微生物 石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的 培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物 鉴别培养基 伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌(菌落呈深紫色并带金属光泽) 2　微生物的筛选与计数 (1)筛选菌株 ①原则：人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 ②菌株筛选原理的比较 土壤中分解尿素的细菌 分解纤维素的微生物 a.选择培养基的成分：尿素作为唯一的氮源 b.鉴定方法：在培养基中加入酚红指示剂，若pH升高，指示剂变红，说明细菌能分解尿素 a.选择培养基的成分：纤维素作为唯一的碳源 b.鉴定方法：刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 (2)统计菌落数目的方法 ①显微镜直接计数法 a．原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 b．方法：用计数板计数。 c．缺点：不能区分死菌与活菌。 ②间接计数法(活菌计数法) a．原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 b．计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 c．操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 易错警示　稀释涂布平板法计数微生物的注意问题 用稀释涂布平板法计数微生物时，要求选择菌落数在30～300的平板进行计数。解题时易出现以下误解： (1)只得到1个菌落数在30～300的平板是错误的。错误的原因是不符合实验的重复原则，易受到偶发因素的影响。 (2)得到3个或3个以上菌落数在30～300的平板，也不一定正确，这可能有两种情况： ①不同平板间差异较大，如得到3个平板，菌落数分别为230、34、240，虽然菌落数均在“30～300”之间，这也是不正确的，因为“34”与“230