NCLs致病相关基因CLN8真核表达载体的构建及检测.docVIP

NCLs致病相关基因CLN8真核表达载体的构建及检测 【摘要】 目的 构建真核表达载体,为在哺乳动物细胞内验证NCLs致病相关基因CLN8与ND1是否存在相互作用奠定实验基础。方法 采用PCR 技术扩增CLN8基因, 将其亚克隆到PEF-Flag真核表达载体,在HeLa细胞中表达, 对表达产物进行Western blot鉴定。结果 特异扩增CLN8基因编码序列, 构建了真核表达载体PEF-Flag-CLN8，在HeLa细胞中表达融合蛋白, Western blot实验能够检测到表达的融合蛋白。结论 成功地构建真核表达载体PEF-Flag-CLN8, 融合蛋白在HeLa细胞中有效表达。 【关键词】 CLN8P;真核表达; 检测 Expressing and testing of CLN8P in eukaryocyte 【Abstract】 Objective To verify the interaction between CLN8 and ND1in mammal cells. Methods The fragment of CLN8 gene was amplified by PCR. The amplified fragment