小麦HMW―GS基因的定向缺失亚克隆法解析.docVIP

小麦HMW―GS基因的定向缺失亚克隆法解析 　　摘 要：针对小麦中HMW-GS基因克隆的方法――定向缺失亚克隆进行了详细的解析，对各个步骤应注意的事项进行了归纳总结，为小麦中HMW-GS基因的克隆提供参考意见。 　　关键词：HMW-GS基因；克隆；定向缺失；测序 　　中图分类号：S512.1文献标识码：A 　　高分子量谷蛋白亚基（High-molecular-weight subunits，HMW-GS）是普通小麦（Triricum aestivum L.，BBDD，2n=6x=42）胚乳中的重要贮藏蛋白，其组成和含量影响小麦的加工品质。不同小麦品种的高分子量麦谷蛋白亚基（HMW-GS）基因有多个复等位基因。每个位点都有分别控制着x-型亚基（分子量较高）和y-型亚基（分子量较低）紧密连锁的基因[1，2]。正常表达的HMW-GS基因的编码区均不含有内含子，其编码的DNA序列由4个区域组成：信号肽序列（从起始密码子开始的一段63bp的核苷酸序列）；无重复的5′N-末端序列（x型亚基含有243～267bp，y型亚基含有312bp的核苷酸序列）；中央重复区序列（含有1200～2010bp的核苷酸序列），基因的DNA序列长度的差异，主要由基因中部的重复序列大小及重复次数的不同所引起，其变异主要是由该区域内DNA序列的插入或缺失造成的；无重复的3′C-末端区序列（含有312bp