茶多酚联合黄芩提取物对急性百草枯中毒大鼠治疗作用的实验研究.docVIP

茶多酚联合黄芩提取物对急性百草枯中毒大鼠治疗作用的实验研究 　　百草枯（paraquat，PQ）又名对草快、克芜踪，化学名1-1-二甲基-4-4-联吡啶阳离子盐，是一种非选择性、接触性除草剂，对人体毒性强，病死率高[1]。口服百草枯中毒后除引起消化道糜烂、出血外，可致肺、肾、肝等多脏器功能障碍综合征，其特征性的中毒改变为肺组织，早期肺部表现为肺泡上皮细胞受损，肺泡出血水肿、炎症细胞浸润，晚期则为肺纤维化过程，一旦出现肺纤维化，则预后极差[2-4]。PQ中毒机制主要为在体内可生成大量的活性氧自由基，从而引起组织尤其是肺组织的氧化性损害[5-6]，目前缺乏有效的治疗手段，有关特异有效的药物治疗目前还处于探索阶段，有文献报道茶多酚（tea polyphenols，TP）及黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）具有抗氧化性损伤的作用[7-11]。本研究拟就这两种药物在急性PQ中毒治疗中的价值作一探索，并观察茶多酚及黄芩对染毒大鼠血清肝肾功能及SOD-1的影响，探讨其治疗PQ中毒的机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　SPF级健康雄性SD大鼠45只，体质量200～250 g，浙江大学医学院附属第一医院实验动物中心提供。主要试剂 茶多酚粉剂及黄芩提取物粉剂购自上海士锋生物科技有限公司；20%百草枯水剂购自浙江金华金穗农药有限公司，水合氯醛购于上海市国药集团化学试剂有限公司，SOD-1 ELISA试剂盒来自美国Cusabio公司。主要仪器设备：日立7600-110全自动生化分析仪（日本）。 　　1.2 动物分组及实验方法 　　45只SD大鼠随机（随机数字法）分为5组：A组为对照组（每只动物经口一次灌胃生理盐水50 mg/kg）；B组为PQ染毒组（每只动物经口一次灌胃PQ50 mg/kg）；C组为茶多酚治疗组[PQ 50 mg/kg染毒后6 h，再给予茶多酚250 mg/（kg?d）]；D组为黄芩治疗组[PQ 50 mg/kg染毒后6 h，再给予黄芩提取物80 mg/（kg?d）]；E组为复合治疗组（茶多酚+黄芩）[PQ 50 mg/kg染毒后6 h，再给予黄芩提取物80 mg/（kg?d）+TP250 mg/（kg?d）灌胃1次]。 　　各组再按随机原则分为1 d、7 d和14 d三个亚组，每个亚组3只大鼠。B、C、D、E组给予一次性PQ（50 mg/kg）溶液1 mL灌胃染毒，A组同时给予1 mL生理盐水灌胃。C、D、E各组分别于染毒后6 h后给予首次相同的剂量继续干预，每天一次，直至处死。A组和B组同时用等量生理盐水灌胃。在1 d、7 d和14 d时采用腹腔内注射水合氯醛（10%水合氯醛按0.4 mL/100 g腹腔注射）麻醉后仰卧大鼠，腹主动脉采血，静置20 min，3000 r/min离心5 min后取血清，全自动生化分析仪检测血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（Cr）和血尿素氮（BUN）的水平，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清超氧化物歧化酶1（SOD-1）水平（按说明书规程操作）。 　　1.3 统计学方法 　　用SPSS 20.0软件处理数据。计量资料用均数±标准差（x±s）表示，采用单因素方差分析，组间多重比较采用LSD-t检验，以P0.05为差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 各组大鼠血清ALT、AST、Cr、BUN、SOD-1浓度变化 　　血清ALT浓度：B、C组显著高于A组， P0.05；相比于B组，D、E组下降明显，P0.05；而C组虽有降低，但与B组相比差异无统计学意义。 　　血清AST浓度：B、C、D组显著高于A组，P0.05；相比于B组，只有E组明显下降，显著低于B组，P0.05。C组和E组水平较B组虽有一定程度下降，但与B组差异无统计学意义。 　　血清Cr浓度：B、D组显著高于A组，P0.05。相比于B组，C、E组浓度明显下降，显著低于B组，P0.05。D组较B组虽有一定程度下降，但与B组差异无统计学意义。 　　血清BUN浓度：B、C组显著高于A组，P0.05。相较于B组，D、E组浓度下降明显，P0.05；而C组较B组虽有降低，但与B组相比差异无统计学意义，其浓度仍显著高于A组。 　　血清SOD-1质量浓度：B组显著低于A组，P0.05。相较于B组，C、E组质量浓度升高明显，P0.05；而D组质量浓度虽然有上升，但与B组相比差异无统计学意义。 　　见表1。 　　2.2 不同时点ALT、AST、Cr、BUN浓度和SOD-1质量浓度变化 　　不同时点大鼠ALT、AST、Cr、BUN浓度和SOD-1的质量浓度变化见表2。 　　百草枯属于联吡啶类除草剂，动物实验属中等毒类，具有明显的肝肾毒性。