两种方法检测降钙素原的比较分析.docVIP

两种方法检测降钙素原的比较分析 　　【摘要】 目的：比较分析电化学发光法和免疫荧光层析法检测降钙素原（PCT）结果。方法：采用Roche Cobas E601电化学发光仪及广州万孚对120例不同浓度的PCT进行同时检测并对所有数据进行统计学分析。结果：两种方法的阴性组、低风险组、轻度升高组浓度值比较差异无统计学意义（P0.05）；中度及高度升高组浓度值比较差异有统计学意义（P0.05）。结论：免疫荧光层析法操作简便，实时性优于电化学发光法。 　　【关键词】 降钙素原； 电化学发光法； 免疫层析法； Roche Cobas E601发光仪 　　中图分类号 R446 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2014）30-0044-02 　　降钙素原（PCT）即降钙素前体，由神经内分泌细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，生理情况下，血液中检测不到。它是一种脓毒诱导蛋白，作为新的炎症指标，广泛地应用于感染性疾病的诊断、鉴别诊断、病情监测及抗生素应用指导等[1]。随科学技术发展，检测降钙素原的方法有许多，如电化学发光免疫法、胶体金免疫荧光层析定量法、酶联免疫法等[2-3]。本文就前两种方法的降钙素原结果进行比较，旨在分析这两种方法的相关性。 　　1 材料与方法 　　1.1 仪器与试剂 　　Roche Cobas E601发光仪及配套试剂；广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪及配套试剂。 　　1.2 标本来源 　　收集笔者所在医院ICU病房、新生儿科、儿科、呼吸内科、心内科、外科等相关临床科室120例不同浓度的PCT进行同时检测。 　　1.3 方法 　　利用笔者所在医院现有两种仪器，一种是广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪（免疫层析法原理），一种是Roche Cobas E601发光仪（电化学发光原理）；将120例标本离心沉淀，每份标本分成两份，一份用广州万孚生物技术有限公司生产的免疫荧光定量分析仪做PCT测定；一份用Roche Cobas E601发光仪做PCT测定；两种仪器各测得120份数据进行统计学处理。 　　1.4 统计学处理 　　采用SPSS 13.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验；计数资料比较采用字2检验。P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 分组 　　将120例标本按如下浓度进行分组统计分析：A组（阴性组）：PCT0.1 ng/ml，66例；B组（低风险组）：0.11 ng/ml≤PCT 　　0.5 ng/ml，17例；C组（轻度升高组）：0.51 ng/ml≤PCT2.0 ng/ml，23例；D组（中度升高组）：2.01 ng/ml≤PCT10.0 ng/ml，6例；E组（高度升高组）：PCT≥10 ng/ml，8例。 　　2.2 两组检测方法不同组别浓度值比较 　　A、B、C三组在低浓度时差异无统计学意义（P0.05），D、E两组在高浓度时比较差异有统计学意义（P0.05），见表1。 　　2.3 两种方法总阳性率比较 　　以PCT0.1 ng/ml为阳性，免疫荧光层析法组阳性率为46.66%，电化学发光法组阳性率为44.16%，两者比较差异无统计学意义（字2=0.151，P=0.6970.05），见表2。 　　表2 两种方法总阳性率比较 % 　　方法 0.1 g/ml 　　免疫荧光层析法（n=120） 53.34（64/120） 46.66（56/120） 　　电化学发光法（n=120） 55.84（67/120） 44.16（53/120） 　　字2值 0.151 　　P值 0.697 　　3 讨论 　　Roche Cobas E601电化学发光法检测PCT是采用双抗体夹心二步法。其原理利用待检样本与生物素化的单克隆PCT抗体以及钌复合物标记单克隆PCT抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。加入包被链霉亲和素的磁珠微粒，复合物与磁珠通过生物素和链霉亲和素的作用结合，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面，给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增测量发光强度[4]。这种方法线性范围为0.039～63.25 ng/ml[5-6]，且具有快速、所受干扰因素少、与国外最先进的仪器具有良好的相关性[4]等优点。 　　免疫层析法原理是利用高度特异性的抗原抗体反应，标本中的降钙素原与预先包被在聚酯膜上的金标记的降钙素原单克隆抗体结合，结合物在毛细效应下向上层析，随后会被固定在膜上的降钙素原单克隆抗体结合捕获，标本中的降钙素原的含量与被捕获的结合物含量呈正相关，通过免疫定量分析仪扫描检测区，获得相应的光学信号，然后通过内置的标准曲线将信号转换为降钙