实验一（二）蛋白质的理化性质及其含量测定.pptVIP

等电点沉淀（选择性沉淀） 利用蛋白质在等电点时溶解度最低的性质。 注意： 调节溶液到蛋白质等电点时，可以使蛋白质溶解度最低，但是并不意味着蛋白质会沉淀出来。 几种主要沉淀方法比较 （1）变性：在某些理化因素作用下，蛋白质的空间结构被破坏，从而导致其理化性质改变、生物活性丧失的现象称为变性。变性不涉及一级结构的变化。 理化性质的变化：紫外吸收、化学活性及粘度上升，易被蛋白酶水解；溶解度下降、结晶能力丧失。 变性(denaturation)、复性(renaturation) 造成变性的因素： 物理因素（加热、加压、脱水、搅拌、振荡、紫外线照射、超声波作用等） 化学因素（强酸、强碱、尿素、重金属盐、有机溶剂、十二烷基磺酸钠等） 变性的本质 破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质的一级结构。 （2）复性 蛋白质的变性作用如果不过于剧烈，则是一种可逆过程，变性蛋白质通常在除去变性因素后，可缓慢地重新自发折叠成原来的构象，恢复原有的理化性质和生物活性，这种现象成为复性（renaturation）。 （3）应用 ①利用变性： 酒精消毒 高压灭菌 ②防止变性：低温保存生物制品 ③取代变性：乳品解毒(用于急救重金属中毒) 天然蛋白质变性后，所得的变性蛋白质分子互相凝聚或互相穿插结合在一起的现象称为蛋白质凝固。 蛋白质凝固后一般都不能再溶解。 蛋白质的变性并不一定发生沉淀，即有些变性蛋