实验8-酶的分离纯化.PPTVIP

酶促反应速度的测定与酶的活力单位 酶活力测定方法 酶活力的表示方法 各种因素对酶反应速度的影响 底物浓度对酶反应速度的影响 单分子酶促反应的米氏方程及Km 酶反应速度与底物浓度的关系曲线 米氏方程的推导 酶的分离纯化 酶分离纯化的目的 　　酶分离纯化的目的是使酶制剂产品达到应用所需的纯度。 分离纯化过程包括3个基本步骤：1 抽提2 纯化3 制剂 Crude product concentration versus selling price (Dwyer, 1984) 某些生化物质在原料液中的浓度与价格的关系(1984年) 在分离纯化中必须注意：1 防止酶的变性失活；2 在分离纯化过程中的每一步都 应检测酶的活性，以确定酶的 纯化程度和回收率。 第一节 酶活力的测定 几个名词 1 酶活力或酶活性 2 酶活力单位 3 mol催化活性（分子活性）和转换 数（催化中心活力) 4 酶的比活力 酶活力（又称酶活性） (enzyme activity)（IU/g或IU/mL) 指酶催化一定化学反应的能力；用在一定条件下，所催化的反应初速度来表示；是研究酶的特性，酶制剂生产应用以及分离纯化时的一项必不可少的指标。 酶活力单位(enzyme activity unit) 表示酶活力大小的尺度； 一个国际单位（IU）是指在特定条件