实验11-PCR技术.PPTVIP

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  • 2017-01-08 发布于广东
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实验结果与讨论 PCR体系的配制过程中应尽量减少污染的机会,以免出现目的条带以外的杂带。 加样时要认真,吸头垂直进入试剂管,每加完一样要换一个吸头,同时在已加的样品前做个记号以防止错加或漏加,避免污染。 Taq聚合酶(置于冰盒上)应最后加入,尽量减少室温接触机会。加酶时吸头深入不可过深,酶量不能过多。 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 M 电泳结果 PCR技术 一、聚合酶链式反应(PCR)概述 (一)概念 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaciton, PCR),即PCR技术,是近年来发展起来的一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法。 (二)发展历程 1971年 Kjell Kleppe提出PCR原始雏形 概念 1983年 Kary Mullis发明PCR技术 1987年 获得专利 1993年 诺贝尔化学奖 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成: 二、PCR反应的原理和步骤 1、模板DNA的变性:模板DNA经加

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