生工四班酶工程试题..doc

酶的应用： 一、选择题： 哪一个不是属于酶在环境保护中的应用（ D ） 废水处理 B、环境监测 C、可降解材料开发 D、探测空气污染程度 下列哪一个是属于糖化液经过异构酶催化的产物（ B ） 粉状葡萄糖 B、果葡糖浆 C、结晶葡萄糖 D、山梨醇 3、苯丙氨酸代谢途径关系到三种遗传病不包括下列哪种（D） A、尿黑酸症 B、白化病 C、苯丙酮尿症 D、白血病 4、溶菌酶溶解细胞壁中的什么（C） A、N-乙酰胞壁酸 B、N-乙酰氨基葡糖 C、不溶性黏多糖 D、可溶性糖肽 5、 被称为“分子手术刀 ”和“分子针线”的没分别是（A） A、限制性内切酶、DNA连接酶 B、DNA解旋酶、DNA连接酶 C、DNA聚合酶、限制性内切酶 D、DNA解旋酶、DNA聚合酶 名词解释： 淀粉酶（amylase）：能水解淀粉、糖原和有关多糖中的O-葡萄糖键的酶。 2.清除有害物质,起保卫作用-过氧化物酶，朝氧化物岐化酶等 3.协同激素等生理活性物质在体内发挥信号转换,传递与放大作用,调节生理功能。如蛋白激酶 4.催化代谢反应,建立各种各样代谢体系与代谢途径-葡萄糖、氨基酸、核酸代谢 2.请论述超氧化物歧化酶的作用并举一例说明。 超氧化物岐化酶（SOD）在人体内催化超氧阴离子自由基（O2-）和氢离子（2H+）反应生成过氧化氢（H2O2）和氧气（O2）。生成的H2O2 仍具有毒性， 在人体内过氧化氢酶（CAT）或谷胱甘肽过氧化氢酶（GSHPX）的作用下生成对人体无害的水。 故SOD可缓解因超氧阴离子自由基造成的各种人体病变。 例一：肺气肿是由于肺组织的中性白细胞含弹性蛋白酶及弹性蛋白酶抑制剂不平衡所致。弹性蛋白酶抑制剂有α-蛋白酶抑制剂及支气管粘膜蛋白抑制剂两种,均可受O2-攻击而失活,导致肺气肿。故SOD 可治疗肺气肿。 老年性白内障 例二：眼睛对光线具有特殊敏感性，故眼部一般含有高浓度的抗氧化剂。这种自身保护作用随年龄增长逐渐削弱。眼睛晶状体中蛋白质被自由基氧化而变性，形成白内障。改善和提高SOD酶活性，提高机体抗氧化能力，就有可能阻止或延缓老年性白内障的发生、发展。 四．简答题 1. DNA重组是酶在生物技术上的成功应用，请简述DNA重组的步骤？ 答1 目的基因的获得方法有：基因文库（cDNA文库、基因组文库）、PCR（放达效应）、人工合成2 目的基因与载体连接方法有：——粘性末端——全同源性、定向克隆（两种酶切）定向克隆可防止高背景的产生，因为全同源性会造成载体自连、重组子、目的基因自连三种可能，重组子可能还会出现正反插入的情况，使筛选过程复杂。——平末端酶切后也有可能产生平末端，也会出现高背景。——人工接头——连接子（连入带粘性酶切位点的片断，再酶切）、普适子（一条链连上片断，成为粘性末端）、T-A克隆（PCR中使用的Taq聚合酶会根据模板延伸至后在链末尾加上一个A，可在克隆载体上加上T，使之连接）、同聚物加尾（末端转移酶加尾）由于平末端连接效率比较低，可在其两端人工修饰反应体系：目的基因、载体、T4连接酶、缓冲液3 重组DNA导入受体（宿主）细胞——转化、转染、转导、感染主要运用的是原核转化（导入感受态细菌，感受态：处于易于吸收外缘DNA的状态，方法：氯化钙法：DNA与其形成羟基-磷酸钙复合物，抗DNase水解）、真核转染。4 筛选与鉴定方法：——遗传学（表形）——插入失活、蓝-白筛选、抗性基因（四环素Tet、氨苄青霉素Amp）——酶切，在电泳（分子量、构想）——PCR（特异性引物）——核酸杂交（southern blot）——免疫学方法（western blot）——DNA测序（sanger、焦磷酸测序） 2.清除有害物质,起保卫作用。例如过氧化物酶，朝氧化物岐化酶等 3.协同激素等生理活性物质在体内发挥信号转换,传递与放大作用,调节生理功能。例如蛋白激酶 4.催化代谢反应,建立各种各样代谢体系与代谢途径。例如葡萄糖、氨基酸、核酸代谢 酶的分子修饰 一.名词解释 1..酶分子修饰：通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变，从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。即：在体外将酶分子通过人工的方法与一些化学基团（物质），特别是具有生物相容性的物质，进行共价连接，从而改变酶的结构和性质。 2.酶的大分子修饰：使用一些能与酶非共价地相互作用而又能有效地保护酶的一些添加物，如聚乙二醇、右旋糖苷等，它们既能通过氢键固定在酶分子表面，也能通过氢键有效地与外部水相连，从而保护酶的活力。 选择 1.以下哪个不是酶的分子修饰的意义： C A 提高酶的活