生物工程下游技术知识要点(总复习)..doc

第三章 发酵液预处理与固液分离 1.加水稀释法 （稀释后要过滤速率提高的百分比要大于加水量） 1.降低液体黏度 2.加热法 2.调整PH （如利用蛋白质的等电点） 3.凝聚：在电解质作用下，由于胶粒之间双电层电排斥作用降低，电位下降，而使胶体体系不稳定的现象。 过滤特性改变 凝聚值越小，凝聚能力就越强 絮凝：在有些高分子絮凝剂存在下，基于桥架作用，使胶粒形成较大絮凝团的过程。 混凝：包括上述两种方法。 4.加入助滤剂 （最常见的是硅藻土） 5.加入反应剂 1. Ca2+ : 加草酸钠 除杂 Mg2+ :加三聚磷酸钠 C a2+ ：加黄血盐 1.沉淀法 2.杂蛋白的除去： 2.变性法 （有加热法，调PH，加酒精，丙酮等有机溶剂或表面活性剂等。） 3.吸附法 (加入某些吸附剂或沉淀剂吸附杂蛋白而除去) 1.离心 公式：Q=vω2Z 固液分离手段 2.过滤 （1）板框过滤机　（适合固体含量在１％—１０％的悬浮液的分离） 　　　　　　　　　 （２）真空转鼓过滤机　（适合固体含量大于１０％） 　　　　　　　　　 （３）硅藻土过滤机　　（适合固体含量小于０．１％） 第五章 细胞破壁 细胞破壁　１．破壁方法： （１）珠磨法 原理：进入珠磨机的细胞悬浮液与极细的玻璃小珠，石英砂，氧化铝等研磨剂一起快速搅拌或研磨，研磨剂，珠子与细胞之间的互相剪切，碰撞，使细胞破碎。 （2 ）高压匀浆法 原理：利用高压使细胞悬浮液通过针形阀，由于突然减压和高速冲击撞击环使细胞破碎。 是大规模细胞破碎的常用方法。 （3）超声破碎法 （适合实验室用） （4 ）酶溶法 1 .外加酶法 2. 自溶法 （1）加热法 （2）干燥法 （5）化学渗透法 2.破碎率的测定 （1）直接测定法 破碎前利用显微镜计数器直接计数 破碎后用染色的方法把破碎的细胞与未受损 的细胞分开。即可直接计算破碎率。 （2）目的产物测定法 通过测定破碎液中目的产物的释放量 来估算破碎率。 （3）导电率测定法 根据导电率随着破碎率的增加而呈线性增加 第五章．溶剂萃取与浸取 一、溶剂萃取过程的理论基础： ——是把目标物质从第一个液相中依靠更强大的溶解力抽提到第二个液相中。如把水相中的醋酸抽提到醋乙酯中。 1．萃取溶剂的选择 根据萃取目标产物的介电常数，寻找极性相接近的溶剂为萃取溶剂。好的溶剂应满足以下要求： ①萃取容量大，单位体积萃取溶剂能萃取大量产物； ②选择性好，只萃取产物而不萃取杂物； ③有利于相的分散和两相分离，与被萃取相互溶度小，且粘度小，界面传力小 ④易回收和再生； ⑤化学致定性好，不易分解，对设备腐蚀性小； ⑥经济性好，价廉易得； ⑦安全性好，闪点高，对人体无毒或低毒。 二．分配定律和分离因数 1）分离因数 若原来料液中除溶质A