凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题.docVIP

凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题 【摘要】nbsp; 就目前玻片法凝血时间和Duke 氏出血时间测定已淘汰，迄今凝血试验中的凝血酶原时间 (PT) 和活化部分凝血活酶时间（ APTT) 测定已有公认的标准化方案，简要介绍此两种时间测定的方法、标本采集、注意事项、临床意义等。 【关键词】nbsp; 凝血酶；时间测定；凝血活酶 　　血栓与止血实验室检查的临床重要性与日俱增， 检验内容不断扩大， 工作量也日益增多，不断出现方法更新和试剂商品化、操作自动化， 改变了以往靠手工操作、自配试剂、工作效率低的局面。过去的玻片法凝血时间和Duke 氏出血时间测定已淘汰，迄今凝血试验中的凝血酶原时间 (PT) 和活化部分凝血活酶时间(APTT)测定已有公认的标准化方案［1］，并成为实验室检查的常规项目。 　　1nbsp; 玻片法凝血时间和 Duke 氏出血时间测定已淘汰 　　1.1nbsp; 凝血时间nbsp; 凝血时间是检测“内源”凝血系统相关因子缺陷的简易过筛试验。目前国内广泛使用的玻片法很不敏感，国外早在60年代即已淘汰。即使是被认为是较好的试管法，对第Ⅷ、第Ⅸ因子缺乏病例的阳性率也不高，而且操作繁琐。某些出血性疾病需要查凝血时间时，现已改用 APTT 代替［1］。 　　1.2nbsp; 出血时间nbsp; 出血时间是一种检测血小板数量、功能和毛细血管功能的过筛试验。目前我国临床常规实验室普遍采用的 Duke 氏法， 甚不敏感。少数出血性疾病， 例如血小板减少及功能异常及血管性血友病(vWD)等需要作BT时， 应采用出血时间测定器法 ( 改良的 Ivy法 )；后者要求患者在上臂缚压脉带， 充气并维持一定压力， 再用特制的刺血刀具 ( 目前这种刀具主要靠进口 )， 切一标准切口， 记录出血时间。操作繁琐、费时， 不能列为常规。该法影响因素很多，Crowl ey等列举的主要因素有 : 技术操作、切口的方向和部位、皮肤的温度和 Hct，特别是后者影响较大［2］。1991年LIND在《BLOOD》杂志上，发表了题为“出血时间不能预测外科出血”的文章［3］。1990年RODGERS和LEVIN也发表了文章， 认为出血时间要重新评价［4］。该二文收集了大量评价出血时间临床应用价值的文献资料， 认为这种方法 ( 包括出血时间测定器法 ) 对某些出血性疾病， 特别是用于手术前预测出血， 敏感性和特异性均不强。因此在外科术前不必将出血、凝血时间作为常规［1］。如果少数有出血史或出血体征， 需作该项检查时， 凝血时间改用 APTT， 出血时间用正规的出血时间测定器法。下面就简要介绍凝血酶原测定和部分活化凝血活酶测定的方法、原理和注意事项等［1］。 　　2nbsp; PT测定 　　2.1nbsp; 原理nbsp; 将凝血活酶和钙离子加到枸椽酸钠抗凝血浆中，37 ℃保温， 测定血浆凝固时间(PT) 。如果患者凝固时间延长， 表示血浆中缺乏 ( 或降低 ) 某一种或几种凝血因子。本法主要用于过筛检测外源凝血途径依赖维生素K的第Ⅱ、第Ⅶ、第Ⅹ因子。另外，第Ⅴ因子和纤维蛋白原缺乏以及存在相关因子的抑制物时，也可出现异常结果。 　　2.2nbsp; 血液标本的采集、运送及贮存［1］nbsp; 用一次性塑料采血器或硅化玻璃注射器采静脉血液；采血技术要熟练， 不可过多损伤血管及周围组织， 致使组织液混入血液中；采血时止血带不可束缚过紧， 并不应超过5 min；针筒内见到血即应解开止血带， 否则某些凝血及纤溶因子会活化，并可使红细胞比积 (Hct) 升高；血与枸椽酸钠抗凝剂按 9∶1混合， 轻轻颠倒混匀，防止不洁的试管和不合格橡皮塞的污染。贮血应用清洁塑料管或硅化玻璃管或其他不沾湿的容器， 避免接触活化凝血因子；取得血液后应尽快送到血液检验室。在运送中应避免剧烈振动和日光直射；一般要求自采血到测定不得超过4 h，不可久贮；如在室温中贮存过久，第Ⅴ因子会破坏;另一方面，在4 ℃贮存过久， 会导致第Ⅶ因子活化。实验室在取得血样后应尽快分离血浆并尽快测定；血液如发现凝固，应弃去不用。 　　2.3nbsp; 标本制备nbsp; PT和APTT试验都必须用乏血小板血浆（PPP），分离血浆时要求相对离心力（2 000～2 500）Xg，离心30 min。用浊度法测定终点的自动化凝血仪，溶血和较明显的黄疸及脂血均会影响测定结果。 　　2.4nbsp; 造成结果错误的原因［1］ 　　2.4.1nbsp; 与标本或样品有关的问题nbsp; 血标本收集管注入血液过多或不足；患者红细胞比积gt;55% 时未校正枸椽酸盐液体积；用了非规定的抗凝剂 ( 如 EDTA或草酸盐 ) 或未加抗凝剂，