实验一培养基的配制[精选].doc

实验一 培养基的配制 ? 实验目的 1. 明确培养基的配制原理。 2. 掌握配制培养基的一般方法和步骤。 实验内容 学习细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物培养基的配制。 实验原理 培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。 各类微生物对营养的要求不尽相同，因而培养基的种类繁多。培养细菌常用蛋白胨培养基，培养放线菌常用培养基，培养霉菌常用蔡氏培养基或马铃薯培养基，培养酵母菌常用麦芽汁培养基或马铃薯培养基。另外还有固体、液体、加富、选择、鉴别等培养基之分。在这些培养基中，就营养物质而言，一般不外乎碳源、氮源、无机盐、生长因子及水等几大类。琼脂只是固体培养基的支持物，一般不为微生物所利用。它在96℃以上熔化成液体，而在45℃左右开始凝固成固体。在配制培养基时，根据各类微生物的特点，就可以配制出适合不同种类微生物生长发育所需要的培养基。 培养基除了满足微生物所必需营养物质外，还要求有一定的酸碱度和渗透压。霉菌和酵母菌的pH偏酸；细菌、放线菌的pH为微碱性。所以每次配制培养基时，都要将培养基的pH值调到一定的范围。 NaCl 5.0g 水 1000mL pH 7.4~7.6 高氏I号培养基配方 可溶性淀粉 20g NaCl 0.5g KNO3 1g K2HPO4·3H2O 0.5g MgSO4·7H2O 0.5g FeSO4·7H2O 0.01g 琼脂 15—25g 水 1000mL pH 7.4~7.6 马铃薯培养基配方 马铃薯 200g 葡萄糖 20g 琼脂 15~2g 水 100ml 自然pH蔗糖 3g NaNO3 2g K2HPO4 1g KCl 0.5g MgSO4·7H2O 0.5g FeSO4·7H2O 0.01g 琼脂 15~2g 蒸馏水 100ml 自然pH 枯草芽孢杆菌常用培养基配方：1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化钠+0.5g牛肉膏+g琼脂KNO3，K2HPO4·3H2O，MgSO4·7H2O，FeS04·7H2O，马铃薯，蔗糖等。 试管，三角瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，天平，牛角匙， pH试纸(pH 5.5~9.0)，棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。 实验步骤 1．牛肉膏蛋白胨培养基配制方法 (1) 称量 图1-1 培养基的分装 A 漏斗分装装置 ；B 自动分装装置 1 铁架 ；2 漏斗 ；3孔胶管 ；4弹簧夹 ；5玻璃 ；6流速调节 ；7 装量调节 ；8开关 图1-2 棉塞的制作棉塞的作用有二：一方面阻止外界微生物进入培养基，防止由此而引起的污染；另一方面保证有良好的通气性能，使培养在里面的微生物能够从外界源源不断地获得新鲜无菌空气。因此棉塞质量的好坏对实验的结果有着很大的影响。一只好的棉塞，外形应象一只蘑菇，大小、松紧都应适当。加塞时的棉塞的总长度的3/5应在口内，2/5在口外。配制方法配制方法配制方法马铃薯配制方法取去皮马铃薯200g，切成小块，1500mL的烧杯中煮沸30min，注意用玻棒搅拌以防糊底。用纱布过滤，葡萄糖加热煮沸后加入琼脂，继续加热融化并补足失水。分装、加塞、包扎0.1MPa灭菌20 min。配制方法配制牛肉膏应置于何种容器中称量为宜? 配制高氏合成一号培养基时，可溶性淀粉需经什么处理后才能倒入到沸水中?何谓培养基的自然pH?