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本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 动物细胞工程动物细胞融合和单克隆抗体 回顾复习 1.动物细胞工程常用的技术手段有?最基础的是哪个技术? 2.动物细胞培养的过程;原理。 3.动物细胞体外生长的特点;什么是细胞株和细胞系。 4.体细胞核移植技术的过程和原理。 温故知新 温故知新 思考 不同种动物体细胞能否杂交?过程如何?与植物体细胞杂交相比有何不同? 已成功的动物细胞融合实例有很多,如人—小鼠、人—兔、人—鸡、鸡—鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌—鸡 、人—胡萝卜 等细胞的融合。 请阅读课本P52,填写下表 比较 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏病原体的抗原结构。 人们获得抗体的传统方法 小结 思考 怎样大量获得化学性质单一、特异性强的抗体呢? 杰出的成果------单克隆抗体 单克隆抗体 单克隆抗体 单克隆抗体的应用 5. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 ( ) ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A.②④ B.①③⑤ C.①②③④ D.②③ Thank You! * 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 生物种间杂交想像图 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 问题思考 Q1 Q2 获得白菜-甘蓝利用了什么技术? 植物体细胞杂交 此技术的过程? 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 ? ? ? ? 再分化 ? 植物细胞杂交技术利用什么原理? 用什么方法可以诱导植物细胞融合? 一、原理: 细胞膜具有流动性 细胞的全能性 二、诱导方式: 物理法、化学法 植物细胞杂交技术最终获得什么? 三、用途: 获得杂种植株 脱分化 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 获得杂交细胞 获得杂种植株 物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 物理(离心、 振动、电激) 化学(聚乙二醇) 使细胞分散后诱 导细胞融合 去壁后诱导 原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 结果 诱导方法 补充1. 灭活病毒诱导细胞融合的原理: 2.诱导融合的方法 物理法: 化学法: 生物法: 电激 聚乙二醇(PEG) 灭活的病毒 3.意义和用途: (1)意义:突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。 (2)最重要的用途是制备单克隆抗体 什么是抗体?由什么细胞分泌产生?是否具有特异性? 单克隆抗体 动物体内 抗体 (抗原不纯) 血清抗体(抗体不纯) 筛选单一浆细胞 不能无限增殖 抗原 浆细胞 血清 人们获得抗体的传统方法: 向动物体内注射______,使之产生抗体。 抗原 从动物______中分离抗体。 血清 (1)方法: (2)缺点: 产量低、纯度低,特异性差 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 B淋巴细胞 --能分泌特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞 --能无限增殖 杂交细胞 设计方案: (不能无限增殖) (不能产生抗体) 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 科勒 George Kohler 米尔斯坦César Milstein 荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 杂交 细胞 细胞融合 骨髓瘤细胞 经免疫的小鼠 提取 杂交瘤细胞 第一次筛选 克隆化培养和抗体检测 第二次筛选 产生专一抗体的杂交瘤细胞群 体外培养 体内培养 提取单克隆抗体 选择性培养基 单克隆抗体 B淋巴细胞 B, 瘤, BB , B瘤 , 瘤瘤 , 1.细胞融合后培养液中有几种细胞? 单克隆抗体 思考: 3.制备过程中应用哪些细胞工程技术手段? 2. 为什么要对小鼠注射抗原? 获得产生相应抗体的B淋巴细胞(浆细胞) 细胞融合技术、细胞培养技术 本资料由书利华教育网(即数理化网)为您整理 杂交 细胞 细胞融合 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 经免疫的小鼠 提取 杂交瘤细胞 第一次筛选 克隆化培养和抗体检测 第二次筛选 产生专一抗体的杂交瘤细胞群
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