管碟法测定抗生素效价方法的优化研究幻灯片.pptVIP

管碟法测定抗生素效价方法的优化研究 摘要:以实验室发酵的抗生素、杆菌肽为测试品,通过用管碟法测定其效价,从而得到管碟法测定抗生素效价的较优化的一般方法。研究结果表明,上层培养基 8 源的成分以骨蛋白胨、 鱼蛋白胨、 胰酪蛋白胨较好,培养基的厚度影响显著； 其次是指示菌的浓度和上层培养基的酸碱度对测定结果影响较大。 测定抗生素效价的国际常用方法是管碟法，是利用抗生素在特定实验菌的琼脂培养基内的扩散作用， 形成一定浓度的含抗生素的球型区， 抑制了试验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈， 将已知效价的标准溶液和未知效价的供试样品溶液在相同条件下进行培养， 比较两者的抑菌圈的大小， 利用各种不同的计算原理， 就可以准确地测定出供试样品的效价。但是在使用标准样品比较时， 由于各种因素的影响使得抑菌圈在相同剂量下偏小， 不规则， 且对低剂量的效价难于测定， 使效价测定的误差更大。为此， 本实验通过对影响测定抑菌圈大小的各种因素进行比较试验及分析， 得出杆菌肽效价测定的最佳条件。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 指示菌及发酵菌菌种来源! 指示菌金黄色葡萄球菌 ， 发酵试验菌地衣芽孢杆菌 均由重庆师范大学应用微生物研究所提供。 1.1.2 培养基成分! 固体培养基。下层培养基：牛肉膏3g、 蛋白胨10g、 氯化钠5g、 琼脂10g、 H2O1000ml, pH7.2、 121℃灭菌 30min。上层培养基：牛肉膏3g、 蛋白胨 10g、 氯化钠 5g、 琼脂 8g、 H2O1000ml , pH7.2、 121℃灭菌 30min。蛋白胨水培养基 。牛肉膏3g、 蛋白胨10g、 氯化钠5g、 琼脂20g 、 H2O1000ml, pH7.5。 1.1.3杆菌肽标准品! 美国 7590FG1A.7?4 有限公司购得。 1.1.4 设备 离心机 （湘仪） ， 电子天平） ，多 功 能 微 生 物 自 动 测 量 仪） ， 高压灭菌锅， 酸度计 ， 培养皿， 牛津杯， 振荡培养箱， 生化培养箱 ， 细菌过滤器，取液器。 1.2 方法 * *