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HiPure BloodTissue DNA Kit 通用型DNA抽提试剂盒 本产品适合于从组织、细胞、血液、唾液、拭子、血斑、精液等临床样品中快速抽提DNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，整个提取过程只需30~60分钟。得到的DNA可直接用于PCR, 定量PCR, Southern Blot, 病毒DNA检测等实验。 产 品 组 份 产 品 编 号 D3018-01 D3018-02 D3018-03 纯化次数 20次 50次 250次 HiPure DNA Mini Columns I 20 50 250 2ml Collection Tubes 40 100 5 x 100 Buffer ATL 15 ml 40 ml 180 ml Buffer AL 15 ml 40 ml 180 ml Buffer GW1 6.6 ml 13 ml 66 ml Buffer GW2 3 ml 20 ml 50 ml Proteinase K 12 mg 22 mg 110 mg Protease Dissolve Buffer 1 ml 2 ml 10 ml Buffer AE 3 ml 10 ml 30 ml 保 存 条 件 本产品除Proteinase K外，其它组份可在室温(15~25℃)保存12个月，长期保存时需置于2-8℃。低温下，Buffer ATL可能会有沉淀形成，需55℃水浴让沉淀完全溶解。Proteinase K干粉室温运输，收到产品后保存于20~8℃。溶解后Proteinase K需保存于-20℃。 准 备 事 项 无水乙醇(96-100%) 振荡金属浴 溶解Proteinase K (20mg/ml): 加入适量的Protease Dissolve Buffer溶解Proteinase K至终浓度为20mg/ml，轻轻颠倒让蛋白酶K充分溶解。Proteinase K干粉可在2~8℃保存一年，但溶解的Proteinase K须分装保存于-20℃。反复冻Proteinase K会影响其活性。 Buffer GW1使用前，须按瓶子标签所示，加入无水乙醇进行稀释。 Buffer GW2使用前，须按瓶子标签所示，加入无水乙醇进行稀释。 实 验 步 骤 A. 固体组织(1~10mg) 把1~10mg组织样品剪成尽量小的碎片，转移至1.5ml离心管中。 加入200μl Buffer ATL和20μl Proteinase K55℃振荡温浴30~120分钟。 若需去除RNA，加入5μl RNase A至消化液中混匀后，室温静置15分钟。若消化液比较浑浊或 存在未消化物质，10,000 x g离心3分钟。转移上清液至新的1.5ml离心管中。 加入200μl Buffer AL至样品中，高速涡旋混匀15秒，70℃温浴10分钟。 加入200μl无水乙醇至样品中，高速涡旋混匀15秒，按5步进行操作。 B． 抗凝血液(200μl) 在1.5ml离心管中，加入20μl Proteinase K。 转移?200μl抗凝血液、血浆、血水等样品至装有Proteinase K管子中，振荡混匀5秒。 加入200μl Buffer AL至样品中，高速涡旋15秒。70℃振荡温浴10分钟。 加入200μl无水乙醇至样品中，高速涡旋15秒。按5步进行操作。 C． 唾液/血浆等液体样品(DNA含量低样品) 在2ml离心管中，加入20μl Proteinase K。 转移?500μl唾液等样品至装有Proteinase K的离心管中，振荡混匀5秒。 加入500μl Buffer AL至样品中，高速涡旋15秒。65℃振荡温浴30分钟。 加入500μl无水乙醇至样品中，高速涡旋15秒。按5步进行操作。 D． 培养细胞 计算细胞数量。1,000 x g离心5分钟收集细胞（ 2 x 106），小心吸弃培养液。 加入200μl Buffer PBS和20μl Proteinase K至样品中，涡旋1秒打散细胞。 若需去除RNA，加入5μl RNase A至样品中混匀，室温静置15分钟。 加入200μl Buffer AL至样品中，高速涡旋15秒。65℃振荡温浴15分钟。 加入200μl无水乙醇，高速涡旋15秒。按5步进行操作。 E. 精液样品 涡旋打散精液样品，转移150μl精液至1.5ml离心管中。 加入100μl Buffer ATL、10μl DTT(1M)和20μl Proteinase K至样品中。55℃振荡温浴30~60分钟。 加入250μl Buffer AL至重悬液中，涡旋混匀15秒。70℃温浴10分钟。 加入250μl