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抗中性粒细胞胞浆抗体.ppt

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ANCA 抗中性粒细胞胞浆抗体 antineutrophil cytoplasmic antibodies ANCA的发现 1982 Davies 寡免疫复合物型节段坏死性新月体肾小球肾炎(NCGN)病人中首次发现ANCA 。 1985 Vander Woude 研究表明ANCA对Wegener肉芽肿高度敏感,是疾病活动的指标。 What is ANCA? 是以中性粒细胞和单核细胞胞浆成分为靶抗原的自身抗体,主要为IgG型。 ANCA如同抗核抗体谱一样,是一类自身抗体的总称,其作用的抗原成分是中性粒细胞中的髓样颗粒蛋白。 ANCA的测定 间接免疫荧光法 (IIF) 最常用 胞浆型 c-ANCA 核周型 p-ANCA 排除ANA的可能 不典型 a-ANCA 酶联免疫吸附法 (ELISA) 特异性靶抗原 c-ANCA 丝氨酸蛋白酶3 (PR3) p-ANCA 髓过氧化物酶(MPO) 弹性蛋白酶(HEL) 组织蛋白酶G(CG) 溶菌酶(LY) 乳铁蛋白(LF) 通透性杀菌蛋白(BPI) PR3 PR3是中性丝氨酸蛋白酶家族中的一员,是由228个氨基酸组成的分子量为27KD的蛋白酶。 PR3可降解、消化血管壁成分如弹力蛋白及其它细胞外基质。 MPO MPO是中性粒细胞内含量最为丰富的蛋白质,其分子量为133至155KD,由两条重链和两条轻链组成。 MPO在中性粒细胞的氧爆炸或产生超氧阴离子过程中起重要的催化作用。 ANCA的临床意义 ——ANCA相关小血管炎 显微镜下多血管炎(MPA) 变应性肉芽肿血管炎(CSS) 坏死性新月体肾炎(NCGN) (MPA肾脏局限型) Wegener肉芽肿(WG) 与ANCA抗体谱相关的疾病 ANCA阳性的临床意义 单纯间接免疫荧光下 ANCA阳性,其诊断价值极为有限,故对怀疑原发性小血管炎的患者,应进一步检测ANCA所作用的特异性抗原成分,尤其是 PR3和MPO。 * * 细胞质呈弥漫性颗粒样染色(不均匀) 环绕细胞核周围的细胞质亮染 直接应用IIF法判断ANCA时,p-ANCA和ANA很难区分,两者并存时又可互相掩盖,在ANA滴度较高时则鉴别更加困难,容易造成假阳性或假阴性。 以乙醇固定的中性粒细胞为基质有时难以区分pANCA与抗核抗体,借助灵长类肝脏冰冻切片可以将二者相区别:若抗核抗体阳性则所有肝细胞核出现荧光,而pANCA(以及cANCA)阳性,仅在肝血窦的中性粒细胞出现荧光。 ANCA的致病作用 中性粒细胞被攻击 TNF,IL-1等 靶抗原转移到细胞膜表面 附着于血管内皮细胞表面 ANCA与之结合 中性粒细胞脱颗粒、出现反应性氧分子、释放蛋白溶解酶 局部血管损伤,小血管炎症 ANCA不仅与原发性小血管炎相关,也可见于许多其它炎症性疾病,例如炎症性肠病,包括溃疡性结肠炎和克隆氏病;自身免疫性肝胆疾病,如原发性硬化性胆管炎;类风湿性关节炎;和某些肺部非感染性炎症性疾病,如囊性纤维化、肺间质纤维化等。但上述ANCA相关的疾病并不识别PR3和MPO,其特异性ANCA靶抗原为其它胞浆成分。 LF, HEL,其他 pANCA,aANCA PBC PR3, MPO,BPI,其他 pANCA,aANCA 感染 LF,其他 pANCA,aANCA UC LF, MPO(少见) pANCA,aANCA RA LF,HEL, MPO(少见) pANCA SLE PR3(10%)MPO(60%) pANCA,cANCA (少见) CSS PR3(25%)MPO(65%) pANCA,cANCA (少见) NCGN PR3(45%)MPO(45%) cANCA,pANCA MPA PR3(85%)MPO(10%) cANCA,pANCA(少见) WG 特异性靶抗原 IIF荧光模型 疾病 c-ANCA在诊断活动性WG时的敏感性为81%~90%,特异性为97%,多数WG患者的ANCA特异性靶抗原为PR3; 多数MPA患者为p-ANCA,靶抗原为MPO,抗MPO抗体与p-ANCA同时阳性诊断MPA的特异性可高达99%。 *

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