间充质干细胞.pptVIP

* 血液肿瘤患者骨髓间充质干细胞的病理学特性 血液肿瘤科：赵智刚 天津医科大学附属肿瘤医院 * ※概念：MSCs是来源于胚胎发育早期中胚层的 一类多能干细胞 ※来源：骨髓、肌肉、心脏、肝脏、肾脏、真 皮、胰腺、肺脏等 间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells, MSCs） Mackay AM，et al. Tissue Eng, 1998 Pittenger MF, et al. Science, 1999. Wang JS, et al. J Thorac Cardiovasc Surg, 2000 Woodbury D, et al. J Neurosci Res, 2000 Jiang YH, et al. Nature 2002 Zhao ZG et al. Bone marrow transplantation 2005 . * 骨髓中除造血干细胞外还存在着一类 具 有多向分化潜能的间充质干细胞，它具有广泛的分化潜能以及采集 方便，容易在体外培养、诱导和扩 增的 特点，已 成 为细胞治疗中最具发展潜力的细胞来源之一 ,具有很大的应用价值。 Jiang YH, et al. Nature 2002 Peister A, et al Blood, 2004 Reyes M, et al Blood 2001 骨髓源间充质干细胞 * 问题的提出：1. MSCs的来源有限，而且异基因  MSCs归巢效率低 2.骨髓MSCs是否受到疾病的影响以  及受影响的程度 * 实验目的 ※获取血液病患者骨髓间充质干细胞 ※检测血液病患者骨髓间充质干细胞的生物学特性和支持造血功能 * 实验方法 分离不同血液病患者骨髓MSCs 流式细胞仪鉴定细胞的表型 脂肪细胞和骨细胞的诱导分化 检测骨髓源MSCs造血因子表达 支持造血能力的检测 * 结果 1. ALL、MDS骨髓MSCs和正常成人骨髓MSCs具有相似的细胞形态、免疫表型及正常核型，而且都可以向骨和脂肪细胞分化。 2. ALL骨髓MSCs具有和正常成人骨髓MSCs相似的支持造血功能,并且表达造血因子 3. MDS骨髓MSCs也表达造血因子,但是其支持造血能力降低，AML来源的MSCs 4. AML骨髓MSCs在体外生长缓慢,很难传代培养,而其它来源骨髓MSCs增殖快,易于传代培养。AML骨髓MSCs丧失多向分化能力，而且不具有支持造血的能力 。 * 结果（1）骨髓MSCs诱导前的细胞形态及细胞生长方式 A ALL Normal MDS B * 结果（2）骨髓MSCs诱导前的表型特征 CD29 CD44 CD14 CD31 CD34 CD45 HLA-DR MDS ALL Normal * 结果（3）骨髓MSCs体外分化 ALL Normal MDS 成骨分化 脂肪分化 * 结果（4）支持造血作用 CFU/1X10 BMMNC 6 * * * Normal ALL MDS CFU-GM CFU-E CFU-GEMM * 讨 论 干细胞的特点： 1，自我更新能力 2，在体外长期培养 3，高度增殖能力 4，在特定的条件下可以向多系细胞分化 Meirelles L, Br J Haematol, 2003 Deans R Moseley A, Exp Hematol, 2000 Jiang Y, Exp Hematol, 2002 * 我们的研究结果显示 1. ALL, MDS的骨髓MSCs表现出很强的增殖能力 2.上述细胞可以在体外连续传代（P＞10），这意味着我们获取的间充质干细胞可以在体外大量扩增。 3.上述骨髓MSCs表达CD29、CD44和CD105 4.具有多系分化能力 上述结果阐明：在ALL和 MDS的骨髓中存在着一类具有干细胞特点的细胞群体。 * MSCs具有支持造血的能力：在体外维持长 期培养启始细胞增殖 ，还可以促进脐血 CD34+细胞在NOD/SCID鼠中的扩增，增强 其的移植能力。 MSCs具有免疫抑制作用，在体内和体外均 可以抑制T淋巴细胞的增殖 Reyes M et al, Blood 2001 Noort W et al. Exp Hematology 2002 间充质干细胞的功能 Jiang X et al. Blood 2005 Krampera M et al. Blood 2003 *