四川省内江市威远县威远中学高中生物 专题2 课题1《微生物的实验室培养》课件 新人教版选修1.pptVIP

微生物的实验室培养 复 习 一.关于微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类： 细菌、支原体、放线菌、蓝藻 个体微小、结构简单 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌： 原生生物： 显微藻类、原生生物（如：草履虫、变形虫等） 病毒、类病毒、朊病毒 ◆微生物的共同特点： * 二、关于培养基配置原则 目的明确 营养协调 理化条件适宜 经济节约 根据不同的微生物的营养要求配制针对强的培养基。 培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累 如：pH * 氮源、能源、生长因子 碳源、能源、生长因子 * 三、关于无菌技术 * 消毒 灭菌 概念 指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧消毒法、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 适用对象 操作空间、液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿，培养基等 * 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化学药剂（70%酒精等） 紫外线 针对不耐高温的液体 接种室、超净工作台 能耐高温的，需要保持干燥的物品 灼烧法 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 接种工具（接种环等） 吸管 实验操作者的双手 培养皿等玻璃器皿 培养基 1、消毒方法 2、灭菌方法 干热灭菌 * 计算?称量?溶化?灭菌?倒平板 四、关于实验操作 1、制备培养基 * 【例2】进行细菌接种培养实验时，以下哪个操作步骤是非必要的？ A．双手带上胶手套 B．接种前后都灼烧接种环 C．接种前后都灼烧菌种试管口和待接种斜面 试管口 D．要丢弃带菌培养基前，进行高压蒸汽灭菌 或加热灭菌 * 1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 刚刚不烫手时 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 灼烧灭菌，防止瓶口的微生物的污染 有关问题 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 3.为什么将平板倒置？ * 2、纯化大肠杆菌 (1)平板划线法 (2)稀释涂布平板法 平板分离 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落。 根霉 曲霉 青霉 * 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______ 在_______旁冷却接种环，并打开棉塞 将试管口通过火焰 .将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划__________条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。 .将试管通过火焰，并塞上棉塞 火焰 冷却 三至五 灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。 末端 烧红 将平板_____放入培养箱中培养。 倒置 * * 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 避免接种环温度太高，杀死菌种 使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少 * 将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 稀释涂布平板法 * 将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中 取少量稀释液滴加到培养基表面 灼烧 待酒精燃尽后冷却8～10s 涂布 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃 用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 * (3)菌种培养： 培养基倒置放入37℃的恒温箱中。 (4)实验结果观察 (5)菌株的保存方法 固体斜面培养基 甘油管藏 临时保存： 长期保存： 搁置斜面 * 课堂练习 * D 1、下列有关平板划线接种法的操作错误的是 （ ） A．将接种环放在火焰上灼烧 B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行 D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 2．有关倒平板的操作错误的是（ ） Ａ．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C．将培养皿打开，