4.3__酵母细胞的固定化范例.ppt

(4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合： 　　将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸入到注射器中。 * (4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合： 　　将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸入到注射器中。 〖思考4〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞？ * (4)海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合： 　　将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸入到注射器中。 〖思考4〗为什么要海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞？ 防止高温杀死酵母细胞。 * （5）固定化酵母细胞： 　　以恒定速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中，形成凝胶珠状颗粒。 * 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法： 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。 * 这一阶段成功与否呢？怎样评价？ 观察凝胶珠的颜色和形状: 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。 * （6）冲洗：将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次。 （二）．固定化酵母细胞的发酵 * （二）．固定化酵母细胞的发酵 （6）冲洗：将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次。 （7）发酵：150mL10％葡萄糖＋固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→密封→25℃发酵24h。 * 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封？ 〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？ 〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作吗？ * 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封？ 〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？ 〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作吗？ 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 * 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封？ 〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？ 〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作吗？ 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 酵母菌进行无氧呼吸产生的。 * 〖思考5〗发酵过程中锥形瓶为什么要密封？ 〖思考6〗锥形瓶中的气泡和酒精是怎样形成的？ 〖思考7〗在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，需要无菌操作吗？ 酵母菌的酒精发酵需要缺氧条件。 酵母菌进行无氧呼吸产生的。 需要。 * 这一阶段成功与否呢？怎样评价？ 观察发酵的葡萄糖溶液； 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。 还有其他方法吗？ * 课堂小结： 基础知识 固定化酶的应用技术 固定化细胞技术 实验操作 制备固定化酵母细胞 用固定化酵母细胞发酵 * 练习： 1、下列说法不正确的是（ ） A、葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成的是果糖 B、从固定化酶反应柱下端流出的是果糖 C、高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病 D、酶溶解于葡萄糖溶液，可以从糖浆中回收 D * 2、如果反应物是大分子物质，采用那种方法催化受限制( )。 A．直接使用酶 B．使用化学方法结合的酶 C．使用固定化细胞 D．使用物理吸附法固定的酶 C * 3、下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是( )。 A．酶分子很小，易采用包埋法 B．酶分子很小，易采用化学结合或物理吸附法固定的酶 C．细胞个大，难被吸附或结合 D．细胞易采用包埋法固定 A * 4. 关于固定化酶的叙述不正确的是 ( )。 A．既能与反应物接触，又能与反应 物分离 B．固定在载体上的酶可被反复利用 C．可催化一系列反应 D．酶的活性和稳定性受到限制 C * 5、固定化细胞对酶的活性影响最小，根本原因是( )。 A．避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程 B．固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用 C．促化反应结束后，能被吸收和重复利用 D．细胞结构保证了各种酶在细胞内化学反应中有效的发挥作用 D * * 课题3 酵母细胞的固定化 * 温故知新： 1、洗衣粉中添加________可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________________ 四类。 2、影响酶活性的因素有_______、 ________和__________。 酶制剂