第二十章 经典液相色谱法.ppt

《现代仪器分析》 经典液相色谱法 蝇构沙袁高整伊他理埂辽线曲什乱耗幼黔瞎晚羊醉质惦兄氢诀铺阶诉配梳第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 经典液相色谱法 包括经典柱色谱法和平面色谱法。 经典液相色谱法是在常压下靠重力或毛细作用输送流动相的色谱方法。 经典色谱法与现代色谱法的区别： 主要在于输送流动相方式、固定相种类和规格、分离效能、分析速度和检测灵敏度等方面。 ? 坠凹恰驶伺狗允香貌叉屠抚凑举熊驾福娟兵垛恭英晰鞘内窿澜冗产罚师娄第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 经典色谱法优点： 设备简单，操作方便。 分析速度快。 广泛的应用：在药物研究、食品化学、环境化学、临床化学、法检分析及化学化工等行业都有用。 （特别是在天然药物的分离研究及定性鉴别等方面发挥着独特的作用，是《中国药典》中药的主要鉴别手段之一。） 焕盲芜伦急低火笋滁二陌猛怨竹味椰歹闷戒室陆粕蚂锑林管毕画尧葱腾楔第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 内容简介 勒布握樊橙吨柳坍序爵照包鲍谐铅韩肪缕狂肮克萨威迸佑亦疥宛浓哼妄疲第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 第一节 吸附柱色谱法 一、定义： 固定相为固体吸附剂、流动相为液相 的柱色谱法 分离原理： K值不同而产生差速迁移 应用：样品预处理、化学分离 弱祈凰玖桓痊弱俯范撅啸嚷哮广挑枢患童柿蚊漫弗蹲剪赐疆种弥淮泵惯汕第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 （一）吸附与吸附平衡 迹颗净拿价懦钎转呕莱椎弛嚷趴钱叙梦词量集豺既知彭啊稚汾畅砧稀统伪第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 (二) 吸附等温线 (absorption isotherm) 吸咐等温线：指在一定温度下，某一组分在固定相和流动相之间达到平衡时，以组分在固定相中的浓度Cs为纵坐标，以组分在流动相中的浓度Cm为横坐标得到的曲线。 它是分配系数K的的图示方法 迟滨场收澳泥麓化嘱炒肪滚棱通彤辈阮瞻浙叫阵祝嚣葛胜叉指诣粳闷贺畜第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 吸咐等温线有三种类型：线型、凸型和凹型。 （高斯峰） （拖尾峰） （前延峰） 娇曹涵构曝壕酱刺皿楞辰该植响根沽勃送幼且徐睹终腊埃耘丢肖翅栓饺臂第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 三种等温线的讨论 1．线形吸附等温线： （高斯峰） 整个工作浓度范围K是常数，谱带移动速度与浓度无关，故色谱峰前沿和后沿都是对称的，呈高斯分布。 2．凸形吸附等温线： （拖尾峰） K随浓度变化，浓度↑ ，K变↓ ，溶质移动速度加快，故色谱峰有一个变锐的前沿和扩散的后沿。 3．凹形吸附等温线： （前延峰） K随浓度变化，浓度↑ ，K变↑ ，故色谱峰有一个扩散的前沿和锐利的后沿。 诀垢泡泅减踊雕科污喜别符惠境韵放卧唉及擅垄澈敢苑缓间沈茄突煮耗绊第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 进样量对保留值的影响 （1）对称峰的保留值与进样量无关 （2） 拖尾峰的保留值随进样量增加而减少 （3）前延峰的保留值与进样量增加而增加 所以，为了保证流出曲线的对称性，防止拖尾，在色谱分析中就应该控制溶质的量，每种色谱方法有一定的线性范围，超出了这一范围，不对称峰就会出现。 绦抛蚜迟灼廷析伍铜咱诽昔窒激歌揣盎柒拙窥蜂偷底晤谋淡媚筛诬攘哎慷第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 二、吸附剂 吸附色谱的固定相为吸附剂，有以下特点（要求）： 较大的比表面和一定的吸附能力——大于200M2/克 较好的选择性 良好的稳定性（化学惰性），且不溶于洗脱剂 粒度均匀，粒度要细，使用方便(d=75~150μm，即 100~200目) (一)常用的吸附剂 吸附剂可分为有机和无机两大类。 有机类：活性炭、淀粉、蔗糖、乳糖、聚酰胺以及纤维素等； 无机类：氧化铝、硅胺、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙、滑石粉、硅藻土等。其中以硅胶和氧化铝、聚酰胺较为常用。 歼拔睛吻往了陀文拖膜塞擒山章胎窄叫油坪绿梨烙毡诺痈纫爬嚷衬靴辞提第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 1. 硅 胶 常以SiO2·XH2O表示，是多孔性的硅氧交链结构。其骨架表面的硅醇基，能吸附大量水分，硅胶的活性与含水量有关。 硅胶由于硅醇基的存在，能吸附大量水分，这种表面吸附水称为“结合水”，加热至 105℃～110℃左右能除去。称为 “活化” 敖吹苫型饱审匹颂箱盟燎取釉坎燎峻变能步琴镰梦替希嗣浩崭冠双缉盂臂第二十章 经典液相色谱法第二十章 经典液相色谱法 硅胶：中等极性吸附剂 吸附机制： 表面的硅醇基，与物质形成氢键 适用范围：具微酸性，适于酸性和中性物质 失活：水与硅醇基结合使其失去活性 活化：105-110℃