生物化学4第四章 核酸化学幻灯片.pptVIP

ZhangJG-Biochemistry 第四章 核酸化学 张 金 国 第四章 核酸化学(4学时) 第一节 核酸的化学组成 第二节 脱氧核糖核酸 第三节 核糖核酸 第四节 核酸、核苷酸的性质 第五节 核酸的研究方法 重点：各种碱基、核苷酸、戊糖的分子结构特点，DNA、RNA化学组成的异同，DNA、RNA一级结构的概念；DNA双螺旋结构模型的要点，tRNA的三叶草形状，核酸的变性、复性。 了解核酸、核苷酸的性质，PCR技术的原理、DNA重组的基本过程；核酸的分离、提纯和定量测定。 1868年瑞士青年医生Miesher,F.（1844－1895），从脓细胞细胞核中分离出一种含氮和磷特别丰富的沉淀物质，当时曾叫它核素。1872年Miesher又从鲑鱼的精子细胞核中，发现了大量类似的酸性物质，随后有人在多种组织细胞中也发现了这类物质的存在。 因为这类物质都是从细胞核中提取出来的，而且都具有酸性，称为：核酸（nucleic acid）。 1944年Avery通过肺炎双球细菌转化实验证明：DNA是遗传物质。 核酸 （nucleic acid ）定义为： 由核苷酸或脱氧核苷酸通过3′，5′-磷酸二酯键连接而成的一类生物大分子。 具有非常重要的生物功能: 贮存遗传信息和传递遗传信息。 包括核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两类。 1953年，Watson J和Crick F提出了著名的DNA双螺旋结构模型，并对模型的生物学意义做出了科学的解释和预测。 染色体、基因、DNA 1865年Mendol G J 通过豌豆杂交试验提出：决定生物性状的是“遗传因子”； 1909年, Johannsen将遗传因子改为基因(gene)； 基因在染色体上呈直线排列,染色体是基因的载体，基因是遗传的基本单位。 基因的化学本质是DNA； 基因是有遗传效应的DNA片段； 一个基因是编码一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。 细胞分裂和染色体 人的体细胞染色体 DNA是遗传信息的载体，储存遗传信息。 DNA通过复制将亲代的遗传信息传递给子代。 RNA遗传信息的传递者和执行者；重要的有3种： （1）mRNA (messenger RNA)，信使RNA，mRNA在蛋白质的生物合成中起模板作用。它将DNA的遗传信息传递给蛋白质。 （2）tRNA (transfer RNA)，转移RNA，tRNA起携带氨基酸的作用。 （3）rRNA (ribosome RNA )，核糖体是蛋白质合成的场所。 第一节 核酸的化学组成 组成核酸的主要元素有C、H、O、N、P 等, 与蛋白质相比,核酸的元素组成有两个特点： 一是核酸一般不含S， 二是核酸中P元素含量为9％～11％。 这一特征可作为测定核酸含量的方法之一。 核酸的基本构成单位是核苷酸，核酸由多个核苷酸连接而成。所以核酸又称多聚核苷酸。 核苷酸由戊糖、碱基和磷酸三部分组成。 核酸的化学组成 将核酸在酸、碱或酶的催化下逐步降解，分别鉴定降解产生的中间产物和最终产物： 一、 核酸中的糖（戊糖） D-核糖、 D-2-脱氧核糖 二、 含氮碱基（五种碱基） 嘌呤碱、嘧啶碱 稀有碱基（修饰碱基） 三、核苷 核苷是核糖或脱氧核糖与碱基缩合形成的。核苷中糖与碱基间的连接键为N—C糖苷键 嘌呤核苷C’1—N9 、嘧啶核苷C’1—N1 。 习惯上在核苷或核苷酸中戊糖的碳原子编号数字上加“ ′”以区别碱基中原子编号。 腺嘌呤核苷，简称腺苷，用G表示，余类推。 脱氧腺嘌呤核苷，简称脱氧腺苷，用dG表示，余类推。 在多聚核苷酸中，嘌呤、嘧啶的反式构象占优势。 教材p105，反式腺嘌呤核苷 四、 核苷酸——核酸的基本结构单位 其他核苷酸或其衍生物 1、ATP是生物体内的能量载体 α与β、β与γ之间磷酸酯键为高能键，水解释放自由能△G°′＝－30.5kJ/mol；一般磷酸酯键△G°′＝－8.4kJ/mol 2、cAMP是化学信使 3′，5′环化单磷酸腺苷（cAMP）和 3′，5′环化单磷酸鸟苷（cGMP）， 分别具有放大和缩小激素作用的功能，称为第二信使。 3、NAD是辅酶和辅基的成分 如：NAD、NADP、FAD、CoA都含腺苷酸 4、5′-IMP 用作食品工业添加剂 如：5′-肌苷酸（次黄嘌呤核苷酸）、 5′-鸟苷酸具有很强的助鲜作用。 第二节 脱氧核糖核酸 一、DNA碱基组成规律 DNA分子中的四种碱基： 腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶 1943年，英国的Chargaff发现：不同来源的DNA其碱基组成显著不同，但腺嘌呤（A）和胸腺嘧啶（T），鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）的摩尔含量总是相等的，即[A]=[T]、[G]=[C]；因此嘌呤的总含量和嘧啶的总含量是相等的，即A+G=C+T，这一