生物化学 酶工程课件.pptVIP

第二章?????酶 Enzyme 常用网址 KEGG http://www.genome.ad.jp/kegg ENZYME Enzyme nomenclature database /enzyme Integrated Enzyme Database（IntEnz） http://www.ebi.ac.uk/intenz/index.html 1. 了解酶的化学本质、催化特点，分类及命名 3. 掌握酶原激活的概念，高效的机理 4. 掌握酶米氏方程、温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响，掌握三种可逆抑制作用的动力学特点 5. 了解多酶体系、别构酶、共价调节酶、同工酶、固定化酶的概念 6. 熟知酶分离提纯的一般方法，酶活力、比活力的概念及其测定方法 第一节?? 酶学概论 一、概念 1.酶的生物学意义（大肠杆菌生命周期30分钟） 酶使得生物体内化学反应容易和迅速 限制性核酸内切酶（限制-修饰） 2.酶是一种生物催化剂 生物催化剂 ：酶 enzyme 核酶 ribozyme 二、酶催化反应的特点 1.高催化效率 酶催化反应速度是无催化反应的108-1020倍 2.高专一性 酶对反应的底物和产物都有极高的专一性 几乎没有副反应发生 3.反应条件温和 温度低于100℃，正常大气压，中性pH环境 三、酶的化学本质 经典概念：酶是具有催化功能的蛋白质 1.酶的组成 仅由蛋白质组成的酶：脲酶、溶菌酶、淀粉 酶、脂肪酶、核糖核酸酶等 酶蛋白+辅助因子（全酶）：超氧化物歧化 酶（Cu2+、Zn2+）、乳酸脱氢酶（NAD+） 酶的专一性由酶蛋白的结构决定，辅助因子 决定反应类型（传递电子或某些化学基团） 2.酶的辅助因子 主要有金属离子（Fe2+、Fe3+ 、Cu+、Cu2+、 Mn2+、、Mn3+、Zn2+、Mg2+ 、K+、 Na+ 、Mo6+ 、 Co2+等）和有机化合物 辅酶：与酶蛋白结合较松，可透析除去 辅基：与酶蛋白结合较紧 酶 辅助因子 CuZn-SOD Cu2+ Zn2+ Mn-SOD Mn2+ 过氧化物酶 Fe2+或Fe3+ II型限制性核酸内切酶 Mg2+ 羧肽酶 Zn2+ ? 酶蛋白决定酶专一性，辅助因子决定酶促反 应的类型和反应的性质 NAD+构成各种专一性强的乳酸脱氢酶、醇脱 氢酶、苹果酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶 生物体内酶种类很多，辅助因子种类很少， 一种辅助因子可与多种酶蛋白结合 四、酶按照亚基组成及结构特点分类 单体酶、寡聚酶、多酶复合体 1.单体酶 由一条或多条共价相连的肽链组成的酶 牛胰RNase 124 单链 鸡卵清溶菌酶 129 单链 胰凝乳蛋白酶 三条肽链 单体酶种类较少，一般催化水解反应 2.寡聚酶 由两个或两个以上亚基组成的酶 A.含相同亚基的寡聚酶 苹果酸脱氢酶（鼠肝），2个相同的亚基 B.含不同亚基的寡聚酶 琥珀酸脱氢酶（牛心），αβ2个亚基 大多数寡聚酶是胞内酶，而胞外酶一般是单体酶 3.多酶复合体 两种以上的酶靠非共价键结合而成。其中每一 种酶催化一个反应，反应依次进行，构成一个代 谢途径或代谢途径的一部分。 大肠杆菌丙酮酸脱氢酶复合体： 丙酮酸脱氢酶（E1） 2×96000 二氢硫辛酸转乙酰基酶（E2） 70000 二氢硫辛酸脱氢酶（E3） 2×56000? 12个E1 二聚体 24×96000 24个E2 单体 24×70000 6个E3 二聚体 12×56000 总分子量 560万 酶的活性中心 第二节?? 酶的命名及分类 一、习惯命名 1.根据底物命名（绝大多数酶） 蛋白酶、淀粉酶