高一生物降低化学反应活化能的酶选读.ppt

1.天然酶 工业用酶制剂多属于通过微生物发酵而获得的粗酶，价格低，应用简单，产品种类少，使用范围窄。例如，洗涤剂、皮革生产等用的蛋白酶；纸张制造、棉布退浆等用的淀粉酶；漆生产用的多酚氧化酶；乳制品用的凝乳酶等。天然酶的分离纯化随着各种层析技术及电泳技术的发展，得到长足的进展，目前医药及科研用酶多数从生物材料中分离纯化得到。 2.固定化酶 将水溶性酶用物理或化学方法处理，固定于高分子支持物(或载体)上而成为不溶于水，但仍有酶活性的一种酶制剂形式，称固定化酶(immobilized enzyme)。 包埋法 吸附法 共价偶联法 交联法 2.固定化酶 包埋法 吸附法 将水溶性酶用物理或化学方法处理，固定于高分子支持物(或载体)上而成为不溶于水，但仍有酶活性的一种酶制剂形式，称固定化酶(immobilized enzyme)。 共价偶联法 交联法 溴化氰亚氨碳酸基偶联法 OH OH BrCN H2O O O C=N-E O-CO-NH-E OH O-C-NH-E NH OH H2N-E （多羟基载体） O-CONH2 OH （惰性） O O C=NH （活泼） O—C —N OH 戊二醛交联法 OHC(CH2)3CHO 戊二醛 H2N-E N -HC=N-E-N=CH（CH2）3-CH=N- E- N CH CH 3.化学修饰酶 通过对酶分子的化学修饰可以改善酶的性能，以适用于医药的应用及研究工作的要求化学修饰的途径，可以通过对酶分子表面进行修饰，亦可对酶分子的内部修饰。 其主要方法有： （1）化学修饰功能基 最经常修饰的氨基酸残基既可是亲核的（Ser、Cys、Thr、Lys、His），也可是亲电的（Tyr、Trp），或者是可氧化的（Met）。 （2）交联反应 用某些双功能试剂能使酶分子间或分子内发生交联反应。 （3）大分子修饰作用 可溶性高分子化合物如肝素,葡聚糖,，聚乙二醇修饰酶蛋白的侧链，提高酶的稳定性，改变酶的一些重要性质。 4.人工模拟酶 人们模拟酶的生物催化功能，用化学半合成法或化学全合成法合成了人工酶催化剂。 例如将电子传递催化剂［Ru(NH3）3〕3与巨头鲸肌红蛋白结合，产生了一种“半合成的无机生物酶”，这样把能与O2结合，而无催化功能的肌红蛋白转变成能氧化各种有机物（如抗坏血酸）的半合成酶，它接近于天然的抗坏血酸氧化酶的催化效率。 全合成酶不是蛋白质，而是一些有机物。它们通过并入酶的催化基团与控制空间构象，从而像天然酶那样专一性地催化化学反应。利用环糊精成功地模拟了胰凝乳蛋白酶、RNase、转氨酶、碳酸酚酶等。 人工模拟酶?-benzyme 环糊精 催化侧链 催化侧链连接到环糊精上，可模拟胰凝乳蛋白酶 环糊精分子结构 环糊精结构模型 （二）生物酶工程 生物酶工程是酶学和以DNA重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物，因此，亦可称为高级酶工程（advanced enzyme engineering）。 主要包括： 用基因工程技术大量生产酶（克隆酶）； 对酶基因进行修饰，产生遗传修饰酶（突变酶）； 设计新酶基因，合成自然界不曾有的新酶 生物酶工程示意图 酶的蛋白质结构功能 新酶分子蓝图 选择性修饰方案 突变酶 新酶 克隆酶 产品 效用 发展 酶基因 遗传设计 遗传修饰 DNA重组技术 DNA重组技术 四、酶的专一性 ◇ （一）酶的专一性 ◇ （二）关于酶作用专一性的假说 （一）酶的专一性 酶的专一性 又称为特异性，是指酶只能催化一种底物或一类结构相似的底物，酶对所催化底物严格的选择特性为酶的专一性。 酶作用的专一性 结构专一性 立体异构专一性 族（基团、键）专一性 绝对专一性 光学异构专一性 几何异构专一性 基团、键专一性：可作用于一类或一些结构很相似的底物。 RCOO- +R OH + H+ ′ 酯酶：R—C—O—R′ + H2O O O CH2OH OH OH OH 1 5 α-葡萄糖苷酶 O R +H2O O CH2OH OH OH OH OH 1 5 + ROH 绝对专一性：只能作用于某一底物。 脲酶：H2N—C—NH2 + H2O O 2NH3 + CO2 （二）关于酶作用专一性的假说 ◇ 1.“三点结合”的催化理论 ◇ 2.锁钥学说 ◇ 3.诱导契合学说 1.“三点结合”的催化理论 认为酶与底物的结合处至少有三个点，而且只有一种情况是完全结合的形式。只有这种情况下，不对称催化作用才能实现。 2.锁钥学说 认为整个酶分子的天然构象是具有刚性结构的，酶表面具有特定的形状。酶与底物的结合如同一把钥匙对一把锁一样。 3.诱导契合学说 该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状，而只是由于底物的诱导才形成了互补形状. 五、酶的