血浆脂蛋白的分类.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 测定血清FFA法有: 滴定法、比色法、原子分光光度法、效液相层析 法酶法，一般多以酶法测定。 作FFA测定的标本,一定要注意: 在4℃条件下分离血清并进行测定。 贮存的标本仅限于24h内，若保存三天，其升高值约30％，使结果不准确。 参考范围: 成人0.4～0.9mmol/L 儿童和肥胖成人稍高 荧光法、比色法 、荧光法及比色法较适用。 标本:全血标本室温可保存24h，浆(清) 4～8℃冷藏可保存3天、冷冻可保存1周。脂血和黄胆，测定结果偏高。 参考范围 荧光法：2～4μmol/L 比色法：男性4.14±0.78μmol/L 女性3.97±0.77μmol/L 过氧化脂质测定　　 电泳分离法分离, 各种脂蛋白，主要是: CM(原点) α-LP β-LP Preβ-LP 因为正常空腹12h后，血浆中无CM存在。 二、血浆脂蛋白测定　　 电泳分离法　　 血浆4℃ 16h～24h静置，观察血浆混浊程度，称为血浆静置实验: 　若出现奶油样上层，即CM增加，若下层为混浊者,即VLDL增加。 　若LDL增加，血浆仍呈现透明状态。 　 健康人，实验阴性。 血浆静置实验　　 脂蛋白是一种既有蛋白质又有胆固醇，还有磷脂的复合体，如何定量，尚无一种较为理想的方法因为脂蛋白中胆固醇含量较为稳定，因此目前以测定脂蛋白中胆固醇总量的方法作为脂蛋白的定量依据。 参考范围： (1)血清HDL-C 0.9mmol/L以上 (2)血清LDL-C 成人 2.1～3.1mmol/L 儿童 2.8mmol/L以下 血浆脂蛋白胆固醇测定　　 间接法计算法 利用血清中TC、 TG和HDL-C含量按公式推算出LDL-C的量。 这一方法是Friedewald于1972年发明的一个经验式： 这一公式是有条件的： 空腹血清不含CM TG浓度在4.60mmol/L以下 Ⅲ型高脂血症除外 LDL-C=TC－[HDL-C+(TG×1/5)] 高胆固醇血症监测方案　　 高胆固醇血症等 高脂血症均建议 按此方案进行监测 Lp(a)测定法:　　 (1)免疫法：免疫透射比浊法使用最为广泛， (2) Lp(a)-C测定法： 测定方法有: 超速离心法、麦胚血凝素法和琼脂糖凝胶电泳法，后两种方法在临床应用较广。 人群中血浆Lp(a)水平呈偏态分布，个体差异很大，其健康人群血浆含量可达0～1000mg/L范围。 经过人群调查和临床应用研究。 参考范围：300mg/L以下。 血清载脂蛋白(Apo)包括ApoAI、A Ⅱ、 B100、C Ⅱ、CⅢ、E和(a)，已属常规检测项目 检测方法有: (1)免疫扩散法,主要用于科研 (2)免疫火箭电泳,主要用于科研 (3)免疫比浊法 三、载脂蛋白测定　　 测定过程一定要与结构和机能类似的肝脂酶 (HTGL)区别。 LPL是结合在细胞表面作为肝素受体的蛋白多糖，可用注射肝素竞争性地结合到细胞表面的蛋白质多糖分子后，酶被置换下来进入血浆。 采用LPL单克隆抗体的酶免疫方法进行检测，标本为血清或肝素抗凝血浆。 参考范围： 136～321 mg/L。 四、血浆脂代谢相关蛋白与酶的测定　　 血清(浆)LPL测定　　 利用单克隆抗体进行酶联免疫测定，标本必须是肝素抗凝血浆。以函数制作标准曲线再计算检测方法为免疫透射比浊法，目前尚无公认的检测方法和参考范围。 血浆LCAT测定　　 采用微脂粒底物法，即微脂粒被血清中HDL吸附后，成为LCAT底物，在37℃条件下，经一定时间反应，LCAT活性值可依据游离胆固醇的减少量进行定量。目前尚无统一参考检测方法。 参考范围： 382～512 U/L 血浆CETP测定　　 ApoE蛋白表型分型法: IEF 基因分型法: 基因分析技术 (较为简便易行，结果准确可靠) 根据湖北汉族人群调查（1236例） ApoEε常见基因型频率分布: 2/2: 0.5% 、3/2: 12.1% 、3/3: 70.4% 4/3: 15.0% 、4/4: 0.9% 、4/2: 1.3% ApoEε常见等位基因频率分布: ε2: