HPLC法测定“额力根一号”中羟基红花黄色素A的含量.docVIP

HPLC法测定“额力根一号”中羟基红花黄色素A的含量 　　【摘 要】 目的：测定额力根一号中羟基红花黄色素A的含量。方法：采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液（26∶2∶72），检测波长为403nm，流速为1.0mL/min。结果：羟基红花黄色素A在0.3762～3.7620μg（r=0.99991）范围内呈良好的线性关系。羟基红花黄色素A平均加样回收率为97.3%。结论：该方法简便、灵敏，可用于制剂的质量控制。 　　【关键词】 额力根一号；羟基红花黄色素A；HPLC 　　【中图分类号】R914.4 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）24-0018-03 　　Abstract：Objective HPLC determination of hydroxysafflor yellow A in eligen Ⅰ.Methods The HPLC method was used.Octadecyl silane bonded silica gel as a filler ，The mobile phase was a mixture of methanol-acetonitrile-0.7% aqueous phosphoric acid（26∶[KG-*3/5]2∶[KG-*3/5]72） at a flow rate of 1.0mL?min-1 ，and the detecting wavelength was at 403 nm.Results The linear range of hydroxysafflor yellow A was 0.3762～3.7620μg（r=0.99991） and the average recovery rate was 97.3%.Conclusion The method is simple，rapid and accurate.It could be used for the quality control of eligen Ⅰ. 　　Keywords：Eligen Ⅰ；Hydroxysafflor Yellow A； HPLC 　　额力根一号（肝一号）是由丹参、鳖甲、黄芪、党参、当归、三七、柴胡、红花、枸杞子、北豆根、赤芍、青篙、阿胶、拳参、生地十五味药组成的复方制剂，主要治疗肝肿大、肝脓肿、肝癌、肝硬化以及酒精引起的胃酸过多等。额力根一号方中的主要成分红花有活血通经、祛瘀止痛的功效。而羟基红花黄色素A为红花的水溶性成分，具有抑制血小板聚集、抗氧化、抗炎等多种药理活性[1]，本文采用方法简单、准确、重现性好的HPLC法来测定额力根一号中羟基红花黄色素A的含量，实现对额力根一号的质量控制。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 LC-10AT，SPD-10Avp，SIL-HTA，CLASS-VP。 　　1.2 试药 羟基红花黄色素A（中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用。批号：111637―200503）；额力根一号（批号：090525、090603、090326由内蒙古通辽市库伦旗蒙医医院制剂室提供）。 　　2 方法和结果 　　2.1 色谱条件 色谱柱：Phenomenex C18柱（250mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液（26∶2∶72），柱温：30℃，检测波长为403nm，流速为1.0mL/min，进样量10μL。理论板数：按羟基红花黄色素A峰计算应不低于3000。 　　2.2 对照品溶液的制备 称取羟基红花黄色素A对照品13mg，精密称定，置100mL量瓶中，加25%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（制成每1mL含0.13mg的溶液）。 　　2.3 供试品溶液的制备 取额力根一号粉末（过三号筛）约6.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入25%甲醇50mL，称定重量，超声处理（功率300W，频率50kHz）40min，放冷，再称定重量，用25%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得额力根一号样品溶液。 　　2.4 阴性对照溶液的制备 按照额力根一号处方制成阴性对照溶液（不含红花）。 　　2.5 干扰实验 取三种溶液（对照品、阴性及额力根一号溶液）各10μL分别进样检测，结果可见：额力根一号配方中没有对羟基红花黄色素A产生干扰的成分，色谱图见图1～3。 　　2.6 线性试验 分别取2、4、8、12、15和20μL对照品溶液（羟基红花黄色素A），进样。按上述色谱条件进行测定，以对照品进样量为横坐标（X），以峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线。羟基红花黄色素A在0.3762～3.7620μg范围内呈良好的线性关系，回归