新型高抗草甘膦EPSPS基因的克隆及草甘膦N乙酰转移酶的活性位点鉴定.pdf

痧川犬罄 痧7|『大兽 博士学位论文 题 目逝型壶擅堇：邕塍曼里婴曼基固丝毫隆丛萱苴 避．坚圣隧壁篓酶的活连焦壶鉴定 作 者一金 盘 完成日期一2QQ2笙主旦 培养 单位 四川大学 指导 教师 杨志荣教授 教师 单位 四川大学生命科学学院 指导 教师 林敏研究员 教师单位 中国农科院生物技术研究所 专 业 微生物学 研究方向 微生物遗传 授予学位日期 年 月 日 四川大学博士学位论文 图片目录 I．1线性a．roA基因片段AK的制备………………………………… M 1．2AC引物设计示图……………………．．………………………一 加 1．3aPCR检测AK片段………………………………………………一 ” 1．3bPCR检测AC片段……………………………………………… 笱 1．4aroA突变株的抗性平板筛选…………………………………… 笛 1．5AK与基因组DNA同源双交换示意图…………………………· 1．6突变株的PCR验证……………………………………………“ 1．7突变株PCR产物酶切验证………………………………………一 1．8 AKM4188突变株的功能互补实验………………………………………………-28 45 图图图图图图图图图图 2．1草甘膦污染土壤细菌总DNA…………………………………………………… 图2．2土壤细菌总DNA部分酶切………………………………… 惦 图2．3 钉 pACYCl84重组质粒构建图谱……………………………· RD 档 图2．4 EPSPS的互补实验………………………………………… 图2．5 诣 pACRD0质粒的酶切鉴定图谱……………………………· 图2．6草甘膦抗性片段(2，4．82bp)测序分析结果……………… 的 RD 钞 图2．7 EPSPS核苷酸及氨基酸序列…………………………· RD 钉 图2．8 EPSPS的草甘膦抗性实验……………………………一 图2．9原核表达重组体pETRD限制性酶切图谱………………